Příprava mikrovzorků pro biologické aplikace desorpční hmotnostní spektrometrie

Bc. Marek Stiborek

Master's thesis

Microsample preparation for biological applications using desorption mass spectrometry

Anotácia:

Tato diplomová práce se zabývá přípravou mikrovzorků pro techniku laserové desorpce za účasti substrátu spojenou s hmotnostní spektrometrií s indukčně vázaným plazmatem (SALD ICP MS). Byly vyzkoušeny tři způsoby s cílem zvýšení opakovatelnosti této techniky: zvýšení smáčivosti roztoku vzorku pomocí povrchově aktivních látek, modifikace povrchu substrátu difúzním koplanárním povrchovým bariérovým výbojem a přídavek interního standardu do vzorku. Podrobně je zde také diskutován vliv tloušťky naneseného vzorku na intenzitu SALD ICP MS signálů. Při přípravě vzorků pomocí běžné mikropipety a s využitím vhodného interního standardu lze dosáhnout relativní směrodatné odchylky signálů 8 % u modelových vzorků solí a 4 % u vzorků buněčných lyzátů. Poznatky získané při této studii byly následně aplikovány na přípravu a stanovení Cu v reálných biologických vzorcích buněčných lyzátů.

Abstract:

This diploma thesis deals with the preparation of microsamples for substrate assisted laser desorption coupled with inductively coupled plasma mass spectrometry (SALD ICP MS). Three approaches were tried to increase the repeatability of this technique: wettability enhancement of the sample solution using surfactants, surface modification by diffuse coplanar surface barrier discharge, and the addition of an internal standard to the sample. The effect of layer thickness of the deposited sample on the SALD ICP MS signal intensity is also discussed in detail. Through the preparation of samples using a standard micropipette and internal standards, a relative standard deviation of 8 % for model samples with salts and 4 % for cell lysates can be achieved. The findings gained during this study were subsequently applied to the preparation and determination of Cu in real biological samples of cell lysates.

Kľúčové slová

SALD ICP MS, mikrovzorek, polymer, interní standard, DCSBD, wedelolakton, prsní karcinom

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 2. 6. 2017
• Vedúci: prof. Mgr. Jan Preisler, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Chemistry / Analytical Chemistry