Validace HPLC metody stanovení benzodiazepinů a její aplikace na reálných vzorcích

Bc. Marek MUCHA

Master's thesis

Validation of HPLC method for the determination of benzodiazepines and its application to real samples

Anotácia:

Benzodiazepiny jsou v současnosti nejpoužívanější psychofarmaka. Předložená práce se zabývá HPLC metodami stanovení vybraných šesti benzodiazepinů (Alprazolam, Bromazepam, Clonazepam, Diazepam, Chlordiazepoxid a Oxazepam) v tělních tekutinách. Na počátku byly provedeny validace dvou chromatografických metod (jedna byla vyvinuta během práce). Poté byla provedena optimalizace extrakční metody pro získání benzodiazepinů z tělních tekutin. Na závěr byl proveden test stanovení benzodiazepinů ze séra a plné krve. Ze získaných výsledků (korelační koeficienty linearit vyšší než 0,985, odchylka reprodukovatelnosti a opakovatelnosti lepší než ? 10%, odchylka přesnosti a správnosti lepší než ? 10%, výtěžnost extrakce 65 ? 92% a rozdíl ve stanovení benzodiazepinů v séru a plné krvi maximálně 5%) lze vyvodit následující závěry: Kapalinová chromatografie je vhodná metoda stanovení benzodiazepinů v tělních tekutinách a rozdíl ve stanovení benzodiazepinů ze séra a plné krve je zanedbatelný.

Abstract:

Benzodiazepines are the most common psychotropic drugs in the present. The presented work deals with HPLC method for determination of six benzodiazepines (Alprazolam, Bromazepam, Clonazepam, Diazepam, Chlordiazepoxide and Oxazepam) in body fluids. Validation of two chromatographic methods (one was developed during work) was performed at first. Optimization of extraction method for obtaining benzodiazepines from body fluids was performed after that. Test of determination of benzodiazepines from serum and full blood was performed at the end. It is possible to deduce following conclusions from obtained results (correlation linearity coefficients higher than 0,985, deviation of reproducibility and repeatability better than ? 10%, deviation in precision and accuracy better than ? 10%, extraction yield 65 ? 92% and maximum difference in determination of benzodiazepines from serum and full blood 5%): Liquid chromatography is suitable method for determination of benzodiazepines from body fluids and difference in determination of benzodiazepines from serum and full blood is negligible.

Kľúčové slová

benzodiazepiny, HPLC, validace, extrakce

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 20. 4. 2012

Zverejniť od: 20. 4. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: Doc. RNDr. Jiří Kalina, Ph.D.

University of Ostrava

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Chemistry / Analytická chemie pevné fáze