Cytotoxická aktivita vinkarubinu in vitro na lidských nádorových buňkách

Bc. Denisa Kuželová

Master's thesis

Abstract:

Tato diplomová práce se zabývá studiem cytotoxické aktivity vinkarubinu na lidských nádorových buněčných liniích, kterými jsou A549, MCF7 a A2780. Vinkarubin by mohl být v budoucnu použit jako potenciálně terapeutická látka v léčbě nádorových onemocnění. Pro testování cytotoxicity vinkarubinu byly použity dvě metody. První metodou byl test kvantifikace aktivity mitochondriálních dehydrogenáz prostřednictvím XTT a druhou použitou metodou byla analýza buněk v reálném čase pomocí systému xCELLigence. U buněk A549 byl stanoven vliv vybraných koncentrací vinkarubinu na struktury buněčného cytoskeletu. Vinkarubin vykazoval cytotoxický účinek při nejvyšší testované koncentraci (50 mikroM), kde došlo téměř k úplné inhibici buněčné proliferace u všech nádorových buněčných linií. Buněčná viabilita se nejvíce snížila u buněk A549 a MCF7 u dvou nejvyšších koncentrací. U buněk A2780 viabilita klesla jen při nejvyšší koncentraci. Cytotoxicita vinkarubinu byla u buněčné proliferace výrazně dávkově závislá oproti buněčné viabilitě. Dále bylo patrné, že vinkarubin při použití dvou nejvyšších koncentrací značně ovlivňuje mikrotubulární cytoskelet. Na základě těchto výsledků se vinkarubin jeví jako velice perspektivní pro další studium.

Abstract:

This diploma thesis deals with the study of the cytotoxic activity of vincarubine on human tumor cell lines, which are A549, MCF7 and A2780. In the future, vincarubine could be used as a potentially therapeutic agent in the treatment of cancer. Two methods were used to test the cytotoxicity of vincarubine. The first method was the quantification assay of mitochondrial dehydrogenase activity through XTT, and the second method used was real-time cell analysis using the xCELLigence system. In A549 cells, the effect of selected concentrations of vincarubine on the structures of the cell cytoskeleton was determined. Vincarubine exhibited a cytotoxic effect at the highest tested concentration (50 microM), where cell proliferation was almost completely inhibited in all tumor cell lines. Cell viability was most decreased in A549 and MCF7 cells at the two highest concentrations. In A2780 cells, viability decreased only at the highest concentration. Cytotoxicity of vincarubine was significantly dose-dependent in cell proliferation compared to cell viability. Furthermore, it was evident that vincarubine significantly affects the microtubular cytoskeleton when using the two highest concentrations. Based on these results, vincarubine appears to be very promising for further study.

Keywords

vinkarubin, cytotoxicita, XTT test, xCELLigence, A549, MCF7, A2780

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 6. 5. 2024

Accessible from:: 31. 12. 2999

Thesis defence

• Supervisor: RNDr. Karel Královec, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Analysis of Biological Materials / Analysis of Biological Materials