Kultivace mesenchymálních stromálních buněk na 3D matricích

Bc. Jan Hýl

Master's thesis

Cultivation of mesenchymal stromal cells on 3D matrices

Abstract:

Mezenchymální stromální buňky (nebo mezenchymální kmenové buňky, dále MSC) jsou v současné době velmi zajímavým předmětem studia, obzvlášť díky jejich schopnosti podporovat regeneraci poškozených tkání a modulovat imunitní odpověď specificky v místě zranění nebo zánětu. Díky těmto vlastnostem jsou používány jak ve výzkumu, tak i v klinické praxi – např. v regenerativní medicíně. MSC byly izolovány z mnoha typů tkání a orgánů zahrnujících kostní dřeň, tukovou tkáň, kosterní svaly, ale i jiné. Avšak izolace ze žádné ze zmíněných tkání neumožňuje zisk dostatečného množství buněk pro cílové potřeby. Z tohoto důvodu je nutná in vitro kultivace a expanze buněk před jejich aplikací. V této diplomové práci jsem se zaměřil na základní techniky izolace MSC z tukové tkáně. Následně jsem se zabýval hledáním optimálních podmínek pro in vitro kultivace a expanzi MSC převážně se zaměřením na různé typy kultivačních médií a komponent. V další části mé práce jsem testoval vhodné podmínky pro ideální expanzi MSC, podmínky pro kultivaci MSC na 3D matricích s cílem pozdějšího využití na myším modelu.

Abstract:

Mesenchymal stromal cells (or mesenchymal stem cells, MSCs) are currently being intensely studied, mainly for the ability to promote regeneration of damaged tissues and regulate immune responses at the site of inflammation or injury. Thanks to all of these abilities, MSCs are widely used both in research and in practical applications, for example in regenerative medicine. Up to this date, MSCs were isolated from many different tissues and organs, including bone marrow aspirate, adipose tissue, skeletal muscles and others. However, the amount of cells obtained from any of these tissues is not sufficient for final use. Therefore, it is necessary to cultivate and expand MSCs in vitro before any aplication. In this thesis, I studied basic isolation techniqes to produce MSCs from adipose tissue. Next, I focused on finding the optimal in vitro culture conditions for expansion of MSCs, primarily on different types of cultivation medium and other components. Furthermore, I tested the conditions for MSC cultivation on 3D matrices for future use in the mouse model.

Keywords

Mezenchymální stromální buňky, kultivace, 3D matrice, adipocyty, chondrocyty, osteocyty, proliferace, Mesenchymal stromal cells, cultivation, 3D matrices, adipocytes, chondrocytes, osteocytes, proliferation

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 10. 5. 2016

Thesis defence

• Date of defence: 8. 2. 2017
• Supervisor: PharmDr. Martin Čulen, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Experimental Biology / Molecular Biology and Genetics