Kapilární elektroforéza vybraných peptidů a steroidů

Bc. Radka Millionová

Master's thesis

Capillary electrophoresis of selected peptides and steroids

Abstract:

Cílem této práce bylo osvojit si techniku kapilární elektroforézy (CE) s absorpční detekcí a aplikovat ji na separaci vybraných biologicky aktivních sloučenin. Úkolem bylo vyvinout separační metody CE-UV, které budou využity v projektu multidetekční platforma pro mikrokolonové separace, kde budou uplatněny MALDI a ICP MS jako detekční metody. Jedním z cílů bylo dosažení reprodukovatelnosti CE za použití modelových vzorků peptidů angiotensinu I a bradykininu. Na modelových vzorcích byl ověřen fosforylační protokol. Dalším z úkolů byla optimalizace separace vzorků metalothioneinů. V poslední části byl hledán nejvhodnější systém, pro separaci a stanovení skupiny biologicky významných steroidů za použití metody micelární elektrokinetické chromatografie (MEKC), který bude využit k off-line detekci MALDI MS s nanočásticemi jako matricí.

Abstract:

The aim of this work was to acquire a capillary electrophoresis (CE) technique with absorption detection and to apply it to separations of selected biologically active compounds. The task was to develop a separation method – the CE-UV, which will be used in the project a multidetection platform for microcolumn separations where the MALDI MS and ICP MS will be applied as detection methods. One of the aims was to achieve reproducibility of the CE analysis using model solutions of peptides angiotensin I and bradykinin. On the model solutions a phosphorylation protocol was verified. Another task was to optimize a separation of metallothioneins. In the last part the most appropriate system for the separation and determination of biologically important group of steroids by micellar electrokinetic chromatography (MEKC) method was established. This system will be used for a CE-MALDI MS off-line coupling when employing nanoparticles as a matrix.

Keywords

Kapilární elektroforéza, CE, kapilární zónová elektroforéza, CZE, micelární elektrokinetická chromatografie, MEKC, optimalizace, separace, bradykinin, fosforylace, peptidy, proteiny, metalothioneiny, steroidy, kortison, kortisol, kortikosteron, progesteron, 17-hydroxyprogesteron, prednison. Capillary electrophoresis, capillary zone electrophoresis, micellar electrokinetic chromatography, optimisation, separation, phophorylation, peptides, proteins, metallothioneins, steroids, cortisone, cortisol, corticosterone, progesterone, 17-hydroxyprogesterone, prednisone.

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 2. 5. 2011

Thesis defence

• Date of defence: 19. 5. 2011
• Supervisor: prof. Mgr. Jan Preisler, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Chemistry / Analytical Chemistry