Vliv vybraných přírodních látek na jaterní cytochromy P450

Bc. Martina FOJTÍKOVÁ

Master's thesis

The influence of selected natural compounds on the hepatic cytochromes P450

Abstract:

Přírodní látky ve formě doplňků stravy hrají stále významnější roli v životě člověka. Tato práce se zabývá vlivem vybraných přírodních látek (silybin, lykopen, anthokyany) na enzymy, které hrají významnou úlohu při metabolismu léčiv, konkrétně se věnuje ovlivnění aktivity cytochromů P450 (CYP). Důvodem studia této problematiky jsou možné změny hladin aplikovaných léčiv při současné konzumaci účinných přírodních látek, a to z důvodu lékových interakcí na úrovni metabolismu. Jako modelové léčivo byl v práci použit warfarin. V rámci experimentální části byla optimalizována a kalibrována HPLC metoda s UV i fluorescenční detekcí pro stanovení nejvýznamnějších metabolitů warfarinu, které vznikají za účasti CYP. Tato metoda umožňuje v jednom analytickém kroku měřit současně aktivitu několika forem CYP. S využitím sledování vzniku metabolitů warfarinu produkovaných potkaní jaterní mikrosomální frakcí byla provedena in vitro analýza vlivu přírodních látek na aktivity CYP. Výsledek měření ukázal, že silybin mírně inhibuje CYP2C11, lykopen nemá výraznější účinky na studované enzymy a anthokyany inhibují CYP3A2.

Abstract:

Natural compounds in the form of dietary supplements are becoming increasingly important in a person's life. The thesis inquires into the influence of selected natural compounds (silybin, lycopene, anthocyanins) to the enzymes that are important for the metabolism of drugs, and in particular, deals with the interference to the activity of cytochromes P450 (CYP). Investigating this issue is important due the possible difference of levels of active drug ingredients when taken together with the natural compounds in question caused by the interaction on metabolic level. Warfarin was chosen as the model drug. In the experimental part, we optimized and calibrated an HPLC method with both UV and fluorescence detection in order to determine the most important metabolites of warfarin that arise in the presence of CYP. This method allows us to measure the activity of several forms of CYP at once, in one analytical step. Tracking the emergence of warfarin metabolites produced by microsomal fraction of rat liver, we performed in vitro analysis of the influence of natural compounds to the activity of CYP. The results show that silybin slightly inhibits CYP2C11, lycopene has no significant effects to the enzymes under investigation, and that anthocyanins inhibit CYP3A2.

Keywords

xenobiotika, metabolismus, cytochrom P450 (CYP), silybin, lykopen, anthokyany, warfarin, HPLC

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 23. 4. 2012

Accessible from:: 23. 4. 2012

Thesis defence

• Supervisor: Doc. RNDr. Eva Anzenbacherová, CSc.

PALACKÝ UNIVERSITY IN OLOMOUC

Faculty of Science

Master programme / field:
Biochemistry / Biochemistry