Příprava nosiče s imobilizovanou lakázou pro kontrolovanou oxidaci hyaluronanu

Bc. Aneta Vonšovská

Master's thesis

Preparation of the carrier with immobilized Laccase for controlled oxidation of hyaluronan

Abstract:

Cílem diplomové práce bylo připravit nosič s imobilizovanou lakázou, který byl následně použitý při selektivní oxidaci kyseliny hyaluronové, konkrétně hydroxylových skupin na aldehydové. Lakáza v systému jednak zajišťuje regeneraci použitého oxidačního činidla (např. TEMPO) a zároveň umožňuje eliminovat další látky (NaOCl, NaBr). Teoretická část se zabývá strukturou a vlastnostmi enzymu lakázy a stejně tak i kyseliny hyaluronové. Pozornost je věnována používaným oxidačním činidlům se zaměřením na kombinaci s enzymem lakázou. V rámci experimentální části práce byl enzym lakáza imobilizován na vybrané druhy magnetických částic a stanovena její aktivita po imobilizaci. Byly zavedeny metody cílené oxidace kyseliny hyaluronové s využitím vybraných oxidačních činidel. Výsledková část shrnuje dosažené výsledky, byly vytipovány magnetické částice vhodné pro imobilizaci lakázy a při oxidaci kyseliny hyaluronové byla hledána nejúčinnější metoda oxidace s cílem zavedení aldehydových skupin vhodných pro následné zesíťování molekuly kyseliny hyaluronové do nanočástic.

Abstract:

The aim of the thesis was to prepare carriers with immobilized lasace, which was subsequently used in selective oxidation of hyaluronic acid, namely hydroxyl groups on aldehyde. Laccase system but also ensures the regeneration of the oxidizing agent (e.g. TEMPO) and also allows to eliminate additional agents (NaOCl, NaBr). The theoretical part deals with the structure and properties of the enzyme laccase as well as hyaluronic acid. Attention is paid to the oxidants, which are used, with a focus on combination with the enzyme lazy. In the experimental part of the thesis the laccase enzyme was immobilized on selected types of magnetic particles and its activity determined after immobilization. Methods of targeted oxidation of hyaluronic acid have been introduced using selected oxidizing agents. The result section summarizes the results obtained, magnetic particles suitable for the immobilization of the laccase were selected and the most efficient oxidation method was sought for the oxidation of hyaluronic acid to introduce aldehyde groups suitable for subsequent crosslinking of the hyaluronic acid molecule into the nanoparticles.

Keywords

kyselina hyaluronová, lakáza, enzymová aktivita, TEMPO, magnetické částice, imobilizace, oxidace

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 11. 5. 2018

Accessible from:: 31. 12. 2999

Thesis defence

• Supervisor: RNDr. Lucie Korecká, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Special Chemical and Biological Programmes / Analysis of Biological Materials