Vytvoření metodiky stanovení obsahu sacharidů z rostlinných pletiv vyšších rostlin

Bc. Petra TESLOVÁ

Bakalářská práce

Creation of methodics for determination of sugars content in plant tissues of higher plants

Anotace:

Tato bakalářská práce je zaměřena na vytvoření metodiky pro stanovení obsahu sacharidů v rostlinných pletivech vyšších rostlin. Jednou z metod, kterou lze kvalitativně i kvantitativně stanovit obsah sacharidů, je metoda využívající anthronového činidla. Metoda je založena na spektrofotometrické analýze zeleného kondenzačního produktu (s maximem absorbance při vlnové délce 625 nm), který vzniká zahříváním sacharidů s anthronem v kyselém prostředí. Zavedená metodika byla aplikována ve dvou experimentech. V prvním experimentu byl studován vliv nízké a vysoké ozářenosti na obsah sacharidů v rostlinách ječmene jarního (Hordeum vulgare L., cv. Bonus). Rostliny pěstované při ozářenosti vyšší obsahovaly oproti rostlinám pěstovaných při ozářenosti nižší přibližně třikrát více nestrukturních sacharidů. V experimentu druhém byl stanovován obsah sacharidů v rostlinách ječmene jarního (Hordeum vulgare L., cv. Bonus), které byly vystaveny zvýšené UV a VIS radiaci a pěstované za normálních světelných podmínek. Rostliny vystavené zvýšené UV a VIS radiaci obsahovaly o 17,5% méně nestrukturních sacharidů než rostliny pěstované za normálních světelných podmínek. Množství sacharidů ve vzorcích z ječmene jarního (Hordeum vulgare L., cv. Bonus) bylo vypočteno z regresní rovnice kalibrační křivky sestavené z průměrných hodnot absorbancí čtyř nezávislých měření koncentrační řady roztoků směsi fruktosy a glukosy (v poměru 9:1) v rozmezí hmotnostních koncentrací 0-0,150 mg/ml. Směrnice rovnice regresní přímky kalibrační křivky odpovídá kalibračnímu faktoru. Hodnota kalibračního faktoru činila 5,3209 . Množství sacharidů bylo vztaženo na čerstvou hmotnost f.w. v mg/g resp. projekční plochu listu v g/m2. Metodika využívající anthronového činidla poskytovala výsledky srovnatelné s literaturou a je tudíž aplikovatelná pro stanovení obsahu sacharidů v rostlinných pletivech vyšších rostlin. Použitý postup navíc umožňuje stanovení obsahu fotosynteticky aktivních pigmentů.

Abstract:

This Bachelor Thesis deals with a creation of methodics for the estimation of sugars content in plant tissues of higher plants. One of the method which can be use for qualitative and quantitative estimation of sugars content is the anthrone method. The method is based on spectrophotomectric analysis of green product of condensation (with maximum of absorbance for wave lenght 625 nm) which is produced when sugars are heated with the anthrone in acid solution. Established method was applied in two experiments. In the first experiment was studied the effect of low and high irradiance on sugars content in plants of barley (Hordeum vulgare L., cv. Bonus). Plants which were grown under the higher irradiance contained approximately three times more nonstructural sugars in comparison with plants which were grown under the lower irradiance. In the second experiment was determinated sugars content in plants of barley (Hordeum vulgare L., cv. Bonus) which were exposed the higher UV and VIS radiance and which were grown under the normal lighting conditions. Plants which were exposed the higher UV and VIS radiance contained a 17,5% less nonstructural sugars than plants which grown under the normal lighting conditions. Sugars content in samples made from plants of barley (Hordeum vulgare L., cv. Bonus) was computed from a regression equation of calibration curve. The calibration curve was made up as an absorbance-concentration characteristic. The values of absorbance are average values of four measurements of fructose and glucose solution mixture (9:1) in range of concentrations 0-0,150 mg/ml. The angular coefficient of regression equation of calibration curve agrees with a calibration factor. The calibration factor was 5,3209 . Sugars content was expressed in mg/g of fresh weight f.w. or in g/m2 of projection area of leaf. For measurements of sugars and pigments solutions was used a spectrophotometer. The anthrone method gave the results which were comparable with literature so it is applicable for the estimation of sugars content in plant tissues of higher plants. The anthrone method allows to etstimate pigments content as well.

Klíčová slova

Anthronové činidlo, ječmen jarní (Hordeum vulgare L., cv. Bonus), vliv nízké, vysoké ozářenosti a zvýšené UV a VIS radiace, kalibrační faktor, stanovení obsahu sacharidů, stanovení obsahu fotosyntetických pigmentů, spektrofotometrie.

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 26. 6. 2008

Identifikátor: 9674

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 22. 8. 2008
• Vedoucí: Doc. RNDr. Jiří Kalina, Ph.D.

OSTRAVSKÁ UNIVERZITA V OSTRAVĚ

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Aplikovaná fyzika / Biofyzika