Aspekty laboratorní diagnostiky novorozenecké žloutenky, porovnání dvou laboratorních metod a POCT metody stanovení bilirubinu

Martina SLÁMOVÁ

Bachelor's thesis

The aspects of laboratory diagnostics of neonatal jaundice, the comparison of two laboratory methods and POCT method of determination of bilirubin.

Abstract:

Tématem mojí bakalářské práce byla laboratorní diagnostika žloutenky novorozenců. Spočívá ve stanovení koncentrace bilirubinu v plné krvi nebo v plazmě. Hodnotila jsem vzájemnou korelaci a možnost zastupitelnosti dvou laboratorních metod založených na různých principech stanovení, v různých typech biologických materiálů, pomocí statistického vyhodnocení laboratorních výsledků. Problematiku stanovení bilirubinu u novorozenců jsem pojala komplexně a do hodnocení jsem zahrnula i porovnání POCT měření hladiny bilirubinu s laboratorně stanovenou koncentrací bilirubinu v krvi. Teoretická část obsahuje obecné údaje o typech žloutenek a metabolismu bilirubinu v organismu. Dále pak informace týkající se samotné žloutenky novorozenců. Popsala jsem zde příčiny vzniku, zdravotní rizika pro novorozence, která z hyperbilirubinémie vyplývají a uvedla také možnosti terapie. Podklady pro vyhodnocení metod stanovení bilirubinu jsem získala na základě experimentu. Probíhal v Nemocnici Jindřichův Hradec, a.s. na souboru 120 novorozenců. Soubor tvořili termínoví i předtermínoví novorozenci, 37 z nich bylo v průběhu experimentu léčeno fototerapií. Ve vzorku plné krve jsem stanovila koncentraci bilirubinu metodou přímé fotometrie na analyzátoru Cobas b221. Zbylý materiál v odběrové nádobce jsem odstředila a v separované plazmě stanovila koncentraci bilirubinu chemickou azokopulační metodou na analyzátoru Integra 400 plus. Měření POCT prováděly dětské zdravotní sestry na oddělení. Jedná se o neinvazivní měření bilirubinu novorozenců pomocí transkutánního bilirubinometru JM-103 Konica Minolta Hill-Room Air-Shields. K posouzení korelace výsledků jsem použila statistickou metodu lineární regrese (Passing-Bablok) a metodu diferenčního grafu (Bland-Altman). Ze statistického vyhodnocení vyplývá, že laboratorní metody vůči sobě vykazují velmi dobrou korelaci vyjádřenou korelačním koeficientem r = 1,025 a průměrnou diferencí -1,41 umol/l. Pro posouzení měření bilirubinu POCT, jsem použila metodu přímé fotometrie, jako metodu srovnávací. Korelační koeficient sice dosahoval hodnoty 0,803, ale průměrná diference mezi oběma metodami činila -45,6 umol/l. Z těchto údajů vyplývá, že hladiny bilirubinu novorozenců měřené transkutánním bilirubinometrem byly nižší v porovnání s koncentrací bilirubinu stanovenou laboratorní metodou. Z řady studií vyplývá, že měření bilirubinu v režimu POCT pomocí transkutánního bilirubinometru poskytuje mnohdy podhodnocené výsledky. Z tohoto důvodu je nutné, výsledky měření z oblasti diskriminačních hodnot, ověřit v laboratoři. Transkutánní měření bilirubinu novorozenců je spolehlivá screeningová metoda, která eliminuje četnost krevních odběrů u novorozenců. Obecně se nedoporučuje provádět transkutánní měření za podmínek fototerapie, což jsem potvrdila výsledky svého experimentu. Jediný způsob sledování efektu této terapie, při jejím současném provádění, je laboratorní stanovení koncentrace bilirubinu. Z výsledků mojí studie vyplývá, že stanovení koncentrace bilirubinu novorozenců metodou přímé fotometrie v plné krvi výborně koreluje se stanovením chemickou metodou v plazmě. Tato metoda může plnohodnotně nahradit metodu chemickou. Upřednostňuji metodu přímé fotometrie v plné krvi. Na vyšetření je potřeba malé množství vzorku, před analýzou není třeba separace, výsledek je rychle dostupný, obsluha i údržba analyzátoru je jednoduchá. V současné době bývá rovněž obvyklé, že tyto typy analyzátorů, opatřené modulem pro přímé měření novorozeneckého bilirubinu, se často využívají jako POCT přístroje u lůžka pacienta.

Abstract:

The topic of my Bachelor Thesis was laboratory diagnostics of newborn jaundice. It consists in determining full blood or plasma bilirubin concentration. I assessed the cross-correlation and the possible interchangeability of two laboratory methods based on different principles of determination, in different types of biological material, by means of statistical evaluation of lab results. I treated the topic of bilirubin determination in newborns from a complex perspective, and I included a comparison of POCT bilirubin level measurements with lab-determined blood bilirubin concentrations in the assessment. The theoretical part contains general facts about types of icterus and about bilirubin metabolism in the organism. It also contains information pertaining of newborns jaundice as such. I have described the causes, the health risks for the newborn implied by their hyperbilirubinemia, and I have also specified the possible therapy. I have collected the backgrounds for the assessment of the methods of bilirubin determination experimentally. The population consisted of normal term and pre-term babies, 37 of whom were treated with phototherapy during the experiment. I determined the bilirubin concentration in a full blood sample by means of direct photometry on a Cobas b221 analyzer. I centrifuged the remaining material in the collecton tube, and I determined the bilirubin concentration in the separated plasma by chemical azo coupling method on the Integra 400 plus analyzer. The POCT measurements were carried out by the pediatric nurses on the department before every blood sampling. They were non-invasive bilirubin measurements in newborns by means of the transcutaneous bilirubinometer JM-103 Konica Minolta Hill-Room Air-Shields. In order to assess the correlation of results, I used the linear regression (Passing-Bablok) statistical method, and the difference chart (Bland-Altman) method. The statistical evaluation implies that the lab methods show very good mutual correlation, which can be expressed with a correlation coefficient of r = 1,025 and a mean difference of -1,41 umol/l. I used direct photometry method as a comparison method to assess the bilirubin measurements done by the POCT method. While the correlation coefficient reached the value 0,803, the average difference between both methods amounted to -45,6 umol/l. This data clearly shows that newborn bilirubin levels measured by transcutaneous bilirubinometer are lower compared to the bilirubin concentration determined by the lab method. Many studies imply that bilirubin measurements in the POCT mode using transcutaneous bilirubinometer often yield rather underestimated results. Measurement results from the discrimination range must be re-checked in the lab. Transcutaneous measurement of newborn bilirubin is a reliable screening method eliminating the numerous blood takings in newborns. Making transcutaneous measurements during phototherapy conditions is not generally recommended, which was confirmed by my experimental results. The only way of how to monitor the effect of this therapy while the therapy is going on, is by means of lab determination of bilirubin concentration. The results of my study imply that full blood bilirubin concentration determination by direct photometry method in newborns correlates excellently with the plasma determination by the chemical method. This method is fully capable to be used as a substitute for the chemical method. I prefer full-blood determination method. The examination requires only a small quantity of the sample, the sample does not require separation before analysis, the result is available quickly, and analyzer operation and maintenance are simple. Analyzers of this type, equipped with modules for direct bilirubin measurement in newborns are often used as POCT instruments near the patient?s bed.

Keywords

hyperbilirubinémie, žloutenka novorozence, transkutánní bilirubinometr

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2013

Accessible from:: 3. 5. 2013

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Václav Šojdel

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Zdravotní laborant