Studium metabolismu xenobiotik pomocí moderních elektromigračních metod.

Bc. Monika Langmajerová

Diplomová práce

Study of xenobiotic metabolism by meas of CE.

Anotace:

Tato diplomová práce je zaměřena na využití kapilární elektroforézy pro on-line studie enzymových reakcí. Byla sledována biotransformace diclofenaku prostřednictvím cytochromu P450 2C9. Pro mísení reakční směsi uvnitř kapiláry byly využity dva způsoby. První z použitých technik byla elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza, druhý přístup využíval příčnou difuzi laminárního profilu toku. Vznikající látky byly detekovány diodovým polem a hmotnostním spektrometrem s iontovou pastí. Vyšších výtěžků enzymové reakce bylo dosaženo s druhým způsobem mísení reakční směsi, který byl aplikován při analýze spojující všechny kroky od enzymatické reakce, přes separaci vzniklých produktů až k identifikaci těchto sloučenin pomocí iontové pasti.

Abstract:

The objective of this study was to introduce a method for on-line studies of enzyme reactions by means of capillary electrophoresis. Reaction of cytochrome P450 isoform 2C9 with diclofenac was used as model system. Two ways of reactants' mixing inside the capillary were used: electrophoretically mediated microanalysis and techniquie utilizing transverse diffusion of laminar flow profiles. Products of enzymatic reaction were detected by diode array detection or mass spectrometry with ion trap. Higher yields of the enzyme reaction products was achieved with the second method. For this reason, this way of mixing was applied within method integrating incubation of enzymatic reaction, separation of emerged reaction products to their indetification by ion trap mass spectrometry.

Klíčová slova

Kapilární elektroforéza, capillary electrophoresis, elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza, electrophoretically mediated microanalysis, cytochromy P450, cytochrome P450, isoforma 2C9, 2C9 isoform, ionizace elektrosprejem, electrospray ionization, iontová past, ion trap.

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 14. 5. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 4. 6. 2012
• Vedoucí: prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Analytická biochemie