Stanovení vybraných antioxidantů (kyselina askorbová, kyselina močová) v seminální plazmě

Mgr. Petra Drábková

Master's thesis

Determination of selected antioxidants (ascorbic acid, uric acid) in seminal plasma

Abstract:

Kyselina askorbová, ve vodě rozpustný antioxidant, reaguje se superoxidovým, peroxylovým i hydroxylovým radikálem za vzniku oxidované formy - kyseliny dehydroaskorbové. Chrání zárodečné buňky před poškozením vyvolaným oxidačním stresem. Její koncentrace v seminální plazmě je až desetkrát vyšší než v krvi. Kyselina močová je konečným produktem odbourávání purinových bazí. Hraje významnou roli při antioxidační ochraně organismu před škodlivým účinkem volných radikálů. Pro stanovení kyseliny askorbové a kyseliny močové byla použita metoda HPLC s UV detekcí. Byla použita kolona MAG 1, 250 x 4,6 mm, Labiospher PSI 100 C18, 5 ?m (Labio a.s.), opatřená PEEK filtrem (Supelco) a mobilní fáze 25 mmol/l NaH2PO4 - ethanol (97,5:2,5 v/v), pH 4,69. Kalibrační křivka byla lineární v celém rozsahu koncentrací použitých standardů kyseliny askorbové i kyseliny močové. Hladina kyseliny askorbové se pohybovala u jednotlivých souborů pacientů v těchto rozmezích: všichni pacienti (23,6 - 1120,2) ?mol/l (medián 362,0 ?mol/l), kuřáci (23,6 - 908,6) ?mol/l (medián 327,4 ?mol/l), nekuřáci (59,0 - 1120,2) ?mol/l (medián 400,0 ?mol/l). Hladina kyseliny močové se pohybovala u jednotlivých souborů pacientů v těchto rozmezích: všichni pacienti (109,7 - 651,6) ?mol/l (medián 303,9 ?mol/l), kuřáci (163,0 - 557,6) ?mol/l (medián 298,7 ?mol/l), nekuřáci (109,7 - 651,6) ?mol/l (medián 304,2 ?mol/l).

Abstract:

Ascorbic acid, a water-soluble antioxidant, reacts with superoxide, peroxide and hydroxyl radicals to form dehydroascorbic acid. It protects male germ cells against oxidative damage. It is present at approximately ten-fold higher concentrations in seminal plasma compared with blood plasma. Uric acid is the final product of purine bases degradation in humans. It acts important role in an antioxidant protection against the negative effect of free radicals. For the determination of ascorbic acid and uric acid in a seminal plasma a reversed-phase HPLC with UV detection was used. A column MAG 1, 250 x 4.6 mm, Labiospher PSI 100 C18, 5 ?m (Labio a.s.), fitted with PEEK filter (Supelco) and a mobile phase 25 mmol/l NaH2PO4 - ethanol (97.5:2.5 v/v), pH 4.69 were used. Calibration curve was linear in the whole range of tested concentrations of ascorbic and uric acid standards. The levels of ascorbic acid in a seminal plasma of the individual patients were in the following ranges: all patients (23.6 - 1120.2) ?mol/l (median 362.0 ?mol/l), smokers (23.6 - 908.6) ?mol/l (median 327.4 ?mol/l), nonsmokers (59.0 - 1120.2) ?mol/l (median 400.0 ?mol/l). The levels of uric acid in a seminal plasma of the individual patients were in the following ranges: all patients (109.7 - 651.6) ?mol/l (median 303.9 ?mol/l), smokers (163.0 - 557.6) ?mol/l (median 298.7 ?mol/l), nonsmokers (109.7 - 651.6) ?mol/l (median 304.2 ?mol/l).

Keywords

kyselina askorbová, kyselina močová, HPLC, seminální plazma

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 5. 5. 2011

Thesis defence

• Date of defence: 31. 5. 2011
• Supervisor: doc. Mgr. Roman Kanďár, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Special Chemical and Biological Programmes / Analysis of Biological Materials