Detekce koaktivátoru NcoA4 v závislosti na expresi endrogenového receptoru a PSA u na androgenech nezávislých buněk prostaty

Kristýna JUDASOVÁ

Bachelor's thesis

The coactivator NcoA4 detection depending on the expression of androgen receptor (AR) and PSA in androgen-independent prostate cancer cells

Abstract:

Buňky karcinomu prostaty jsou charakteristické změnou exprese androgenového receptoru. Markerem karcinomu prostaty je prostatický specifický antigen PSA. V teoretické části práce je zmiňována struktura a funkce androgenového receptoru i prostatického specifického antigenu a jejich vliv na vznik a vývoj karcinomu prostaty. Pozornost je také věnována koaktivátoru NcoA4, který ovlivňuje změnu nádorových buněk prostaty do na androgenech nezávislého stavu. Slibnými látkami pro léčbu nádorových onemocnění jsou inhibitory histonových deacetyláz. Tato bakalářská práce se soustřeďuje na vliv dvou inhibitorů histonových deacetyláz SAHA a SBHA, kterými byly ovlivňovány buňky na androgenech nezávislých buněčných linií, C4-2, PC3 a DU145 V exprerimentální části byla sledována cytotoxicita testovaných inhibitorů o různých koncentracích. Cytotoxicita byla stanovována ovlivňováním všech tří na androgen nezávislých linií (C4-2, DU145, PC3), ale zvláštní pozornost byla věnována viabilitě buněk buněčné linie C4-2. Bylo zjištěno, že cytotoxický účinek testovaných látek roste s jejich koncentrací. Dále byla detekována exprese androgenového receptoru, prostatického specifického antigenu a koaktivátoru NcoA4 v cytosolické a jaderné proteinové frakci. Vliv na změny všech tří sledovaných proteinů měla pouze SAHA. Exprese androgenového receptoru v cytosolické frakci po 72hodinovém ovlivnění kolidovala s výskytem NcoA4. Na expresi prostatického specifického antigenu v cytosolu měla vliv pouze SAHA. V jaderné frakci byl detekován prostatický specifický antigen i koaktivátor NcoA4. Testovaná látka SBHA neměla na expresi sledovaných proteinů žádný vliv. V diskusi jsou srovnány výsledky obou prováděných testů viability a zhodnocen vliv testovaných inhibitorů histonových deacetyláz na změny v expresi sledovaných proteinů.

Abstract:

Prostate cancer cells are characterized altered expression of the androgen receptor. A marker of prostate cancer is prostate specific antigen PSA. Structure and function of the androgen receptor and prostate specific antigen and their influence on the formation and progression of the prostate cancer, are described in the Introduction. Moreover, the coactivator NcoA4 supports change of the prostate cancer cells into the androgen independent state. Promising drugs for treatment of cancer are histone deacetylase inhibitors. This thesis focuses on the effect of two inhibitors of histone deacetylases SAHA and SBHA that were used for a treatment of the androgen independent cell lines, C4-2, PC3 and DU145. In the experimental part, the effect of different concentrations of two tested HDACs inhibitors on cell cytotoxicity was performed. The cell cytotoxicity was determined inandrogen-independent prostate cancer cell lines C4 -2, DU145 and PC3, but most experiments were performed on C4-2 cell lines with only the AR gene expression. It was found that the cytotoxic effect of the tested inhibitors of HDACs increase with their concentrations. Expression of androgen receptor, prostate specific antigen and coactivator NcoA4 in cytosolic and nuclear protein fraction were detected. The only SAHA has an effect on protein expressions change of the studded proteins. Expression of the androgen receptor in the cytosolic fraction after 72hour biasing interferes with the appearance NcoA4. The PSA expression in a cell cytosol is changed only in cells treated with SAHA. The prostate specific antigen and the coactivator NcoA4 were detected in the cell nuclear fraction. The SBHA has not effect on an expression of the studied proteins. In the discussion, results of the two cell viability tests are compared and an effect of the two studied histone deacetylase inhibitors on expression of the AR, PSA and NcoA4 protein is described.

Keywords

Androgenový receptor, koaktivátory, nuclear receptor coactivator 4, prostatický specifický antigen, androgen-nezávislý

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 12. 5. 2014

Accessible from:: 12. 5. 2014

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Kateřina Smešný Trtková, CSc.

PALACKÝ UNIVERSITY IN OLOMOUC

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biology / Molecular and Cell Biology