Micronucleus test, srovnání In vivo a In Vitro metody

Mgr. Markéta Sekerková

Master's thesis

Micronucleus test, comparsion of In vivo and In Vitro method

Abstract:

Mikrojaderný test zastupuje širokou skupinu genotoxických testů, které slouží k detekci genotoxických látek. V dnešní době tyto testy využíváme k monitorování nových látek, ale i běžně používaných látek v chemickém, farmaceutickém, zemědělském a potravinářském průmyslu. Slouží i k identifikaci přítomnosti genotoxických faktorů v životním prostředí. V důsledku interakce genotoxické látky s DNA (deoxyribonukleová kyselina) dochází k bodovým i strukturním změnám v DNA, které zvyšují strukturní labilitu a narušují integritu v místech poškození DNA. Za určitých podmínek mohou dát vznik mutacím, chromozomálním aberacím, karcinogenezi. Tato práce je zaměřena na detekci genotoxických účinků u vybraných látek mikrojaderným testem in vitro, in vivo. Mezi testované látky byl zařazen cyklofosfamid, kolchicin, formaldehyd, methylcelulosa, sulfid cínatý. Výsledná data testu ukázaly, že sulfid cínatý testovaný metodou in vivo mikrojaderného testu, neprokazuje genotoxicitu. Stejného výsledku jsme dosáhli u mikrojaderného testu in vitro s methylcelulosou. Pozitivní výsledky mikrojaderného testu in vitro byly u cyklofosfamidu, kolchicinu, formaldehydu. U všech testovaných látek byla sledována závislost míry cytotoxicity na změně koncentrace jednotlivých testovaných látek. Tato cytotoxicita se hodnotila mikroskopickým hodnocením a následně hodnocením dle indexu CBPI (proliferační index cytokinetického bloku).

Abstract:

Micronucleus test represents a broad group of genotoxicity tests used to detect genotoxic substances. Today we use these tests to monitor new substances, but substance commonly used in chemical, pharmaceutical, agricultural and food industries. Serves for identifying the presence of genotoxic factors in the environment. As a result of interaction of genotoxic agents with DNA (deoxyribonucleic acid) leads to a point and structural changes in DNA that increase the structural instability and undermine the integrity of the sites of DNA damage. Under certain conditions, may give rise to mutations, chromosomal aberrations, carcinogenesis. This work is focused on the detection of genotoxic effects of selected substance in the micronucleus test in vitro and in vivo. Among the tested substances was included cyclophosphamide, colchicine, formaldehyde, methyl cellulose, Stannous sulphide. The resulting test data show that Stannous sulphide tested using in vivo micronucleus test does not establish the probability or possibility of confirmation of genotoxicity. The same result was obtained in the micronucleus test in vitro with

Keywords

Mikrojaderný test, genotoxické testy, genotoxické látky, chromozomální aberace, DNA, cytotoxicita, index CBPI.

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 4. 5. 2010

Thesis defence

• Date of defence: 1. 6. 2010
• Supervisor: Mgr. Pavla Královcová, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Special Chemical and Biological Programmes / Analysis of Biological Materials