Sledování genové exprese N-acetyltransferáz v HK-2 buňkách

Bc. Barbora Matyková

Diplomová práce

Monitoring of N-acetyltransferases Gene Expression in HK-2 Cells

Anotace:

Diplomová práce se zabývá sledováním genové exprese N-acetyltransferáz v HK-2 buňkách. Teoretická část se věnuje popisu biotransformace xenobiotik se zaměřením na vybrané enzymy. Důraz byl kladen hlavně na N-acetyltransferázy. V závěru se teoretická část zabývala buněčnou linií HK-2 a popisem polymerázové řetězové reakce se zaměřením na PCR v reálném čase a s reverzní transkripcí. Experimentální část je zaměřena na sledování genové exprese N-acetyltransferáz indukovanou acetaminofenem a cisplatinou v adherentní buněčné linii ledvinných proximálních tubulů HK-2. Genová exprese byla sledována metodou RT-PCR. Za tímto účelem byly navrženy oligonukleotidy pro geny N-acetyltransferáz a referenční geny. Následně byly optimalizovány podmínky pro jejich použití pro metodu RT-PCR.

Abstract:

This thesis deals with the monitoring of gene expression of Nacetyltransferases in HK-2 cells. The theoretical part is devoted to the description of the biotransformation of xenobiotics with a focus on selected enzymes. The emphasis was mainly on N-acetyltransferases. In conclusion, the theoretical part dealt with the HK-2 cell line and the description of polymerase chain reaction with a focus on real-time PCR and reverse transcription. The experimental part focuses on monitoring gene expression of N-acetyltransferases induced by acetaminophen and cisplatin in the HK-2 adherent proximal renal tubule cell line. Gene expression was monitored by RT-PCR. For this purpose, oligonucleotides for N-acetyltransferase genes and reference genes were designed. Subsequently, the conditions for their use for RT-PCR were optimized.

Klíčová slova

N-acetyltransferáza, genová exprese, RT-PCR, biotransformace, cisplatina, acetaminofen, adherentní buněčná linie

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 9. 5. 2024

Zveřejnit od: 31. 12. 2999

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Pavlína Nývltová, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví / Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví