Metabolomický rozbor použitých kultivačních médií používaných v asistované reprodukci pomocí kapilární elektroforézy

Bc. Kateřina Svobodová

Master's thesis

Metabolomic Profiling of Spent Culture Media Employed in Assisted Reproduction Using Capillary Electrophoresis

Anotácia:

V posledních letech roste počet párů vyhledávajících lékařskou pomoc za účelem léčby neplodnosti. Jejich poslední možností, jak počít dítě, se stává in vitro fertilizace. Po in vitro fertilizaci se oplodněné vajíčko nechá inkubovat mimo tělo matky po několik dní. Poté se implantují pouze nejlepší embrya. Výběr embryí je založený na hodnocení jejich morfologie embryologem a je spíše subjektivní a nepřesný. Z těchto důvodů se implantuje více embryí současně, aby se zvýšila pravděpodobnost otěhotnění. Tento přístup zvyšuje i pravděpodobnost mnohočetného těhotenství, se kterým jsou spojena rizika předčasného porodu, nízké porodní váhy a mnoha jiných komplikací. Byl však objeven vztah mezi viabilitou embrya a jeho metabolismem, a proto sledování metabolismu embryí by mohlo být objektivní metodou pro výběr embrya. Stanovení pyruvátu, laktátu a vybraných aminokyselin v kultivačním médiu by mohlo poskytnout dostatečné informace k správnému výběru embrya. Pro tyto analýzy je vhodná kapilární elektroforéza s bezkontaktní vodivostní detekcí, která dokáže analyzovat vzorky malých objemů s dobrou citlivostí a účinností separace za poměrně krátkou dobu.

Abstract:

Currently, number of couples seeking for medical help concerning infertility issue is rising. Their last option to give a birth is in vitro fertilization. After in vitro fertilization, a zygote is cultivated for a few days and only the best embryos are implanted into the uterus. Embryo selection is done according to morphological criteria by an embryologist. The selection is rather subjective and inefficient thus multiple embryos are implanted to raise probability of pregnancy. This approach suffers from high frequency of multiple pregnancies linked with health issues which can result in premature birth, low birth weight and many other complications. Relationship between embryo viability and its metabolism has been revealed thus monitoring of embryo metabolism could be objective method for the embryo selection. Analysis of pyruvic acid, lactic acid and selected amino acids in the culture medium can offer sufficient information for proper embryo selection. Capillary electrophoresis coupled with contactless conductivity detection is equal to the task. This method can process samples of low volume with high sensitivity and separation efficiency in a short analysis time.

Kľúčové slová

Kapilární elektroforéza, vodivostní detekce, elektroosmotický tok, asistovaná reprodukce, kultivační médium, capillary electrophoresis, conductivity detection, electroosmotic flow, assisted reproduction, culture medium

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 12. 5. 2014

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 3. 6. 2014
• Vedúci: prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Biochemistry / Analytical Biochemistry