Vliv časné imunitní odpovědi u myší opakovaně pobodaných flebotomy na průběh kožní leishmaniózy

Bc. Karolína Poláková

Diplomová práce

The effect of the early immune events of the mice repeatedly bitten by sand flies on the course of cutaneous leishmaniosis

Anotace:

Leishmanióza je veterinárně a medicínsky významné onemocnění způsobené parazitickými prvoky rodu Leishmania. Životní cyklus těchto parazitů zahrnuje obratlovčího hostitele (včetně člověka) a hmyzího vektora, jimiž jsou samice flebotomů (Diptera: Phlebotominae). Je známo, že během sání krve jsou vektorem do těla hostitele injikovány sliny s imunomodulačním účinkem, který zásadním způsobem ovlivňuje průběh leishmaniové infekce. Právě opakovaná imunizace hostitele slinami nenakažených flebotomů se stala v nedávné době fenoménem, uplatňujícím se při vývoji vakcíny proti leishmanióze. Cílem této diplomové práce je porovnání charakteru imunitní odpovědi proti slinám flebotomů u myší opakovaně pobodaných v oblasti ušního boltce a vyhodnocení vývoje infekce související s histopatologickými změnami po experimentální inokulaci myší původcem kožní leishmaniózy (Leishmania major). Nedílnou součástí pokusů bylo navrhnout protokol pro šetrnou fixaci a histologické zpracovaní ušního boltce, který by umožňoval zachovat tkáně a buňky v jejich přirozené podobě pro histopatologické hodnocení a zároveň v maximálně možné míře zachovat antigenicitu tkáně pro imunohistochemické analýzy. Metodická část práce zahrnující podrobných popis použitých protokolů bude sloužit jako laboratorní manuál pro další studie. Rešeršní část shrnuje současné poznatky týkající se řešené problematiky.

Abstract:

Leishmaniasis is a veterinary and medically important disease caused by protozoan parasites of the genus Leishmania. The life cycle of these parasites includes a vertebrate host (including humans) and an insect vector – the females of sand flies (Diptera: Phlebotominae). Recent studies have shown that during blood feeding vector injects saliva with an immunomodulatory effect into the host's body that significantly affects the course of leishmania infection. Repeated immunization of the host with non-infected sand flies’ saliva has recently become a phenomenon applicable in the development of a leishmaniasis vaccine. The aim of this diploma thesis is to determine the character of the host immune response against vector’s saliva in mice repeatedly bitten in the ear pinnae, and to compare the development of leishmania infection and related histopathological changes after experimental inoculation of mice with Leishmania major. An integral part of the experiments was to design a protocol for gentle fixation and histological processing of the ear pinnae allowing the simultaneous preservation of tissues and cells in their natural form for histopathological evaluation and tissue antigenicity for immunohistochemical analyses. The methodical part, including a detailed description of the protocols used, will serve as a laboratory manual for further studies. The literature review summarizes the recent knowledge on the thesis topic.

Klíčová slova

Leishmania, kožní leishmanióza, flebotomus, imunitní reakce, vektor, parazit, hostitel, imunohistochemie, histopatologie, cutaneous leishmaniosis, sand fly, immunity response, vector, parasite, host, immunohistochemistry, histopathology

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 4. 5. 2022

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 21. 6. 2022
• Vedoucí: doc. RNDr. Andrea Bardůnek Valigurová, Ph.D.
• Oponent: RNDr. Lucie Panská, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Zoologie / Zoologie