Parametry hyaluronanu ovlivňující rychlost jeho enzymatické degradace hyaluronidázou

Bc. Tereza Stará

Bachelor's thesis

Parameters influencing the rate of enzymatic degradation of hyaluronan by hyaluronidase

Anotácia:

Hyaluronidázy (HYALs) jsou enzymy, které jsou důležité ve fyziologických funkcích organismu vzhledem k jejich schopnosti degradovat glykosaminoglykany (GAG). Mezi nejčastěji a nejúčinněji degradovaný GAG patří lineární polysacharid hyaluronan (HA), který byl původně považován pouze za výplňový materiál extracelulární matrix (ECM). Avšak nedávné studie dokazují, že ve skutečnosti sehrává významnou roli v různých biologických procesech, které jsou závislé na jeho molekulové hmotnosti (MW), a proto je nutné pochopit jeho metabolismus v živých organismech. V práci byl pozorován časový průběh hydrolýzy HA komerčně dostupným enzymem bovinní testikulární hyaluronidázou (BTH) v závislosti na jeho MW s využitím kolorimetrické metody. Testované vzorky HA o MW 1500 a 500 kDa a o MW 531 kDa a 150+148 kDa s nízkou polydisperzitou byly biotechnologicky připraveny ve společnosti Contipro a.s. Získaná data potvrdily, že BTH má dvě pH optima 3,5 a 5,4, zároveň naznačily, že BTH degraduje HA mnohem rychleji v prostředí o pH 3,5. Nejvyšší rychlost degradace BTH byla zaznamenána u MW 1500 kDa, zatímco nižší rychlost vykazovala BTH u MW 150+148 kDa.

Abstract:

The hyaluronidases (HYALs) are enzymes that are important in the physiological functions of organisms due to their ability to degrade glycosaminoglycans (GAG). The most often and most effectively degraded GAG is the linear polysaccharide hyaluronan (HA), which was originaly considered to be the extracellular matrix (ECM) filler material. However, recent studies show that it actually plays an important role in various biological processes that dependents on its molecular weight, and therefore it is necessary to understand its metabolism in living organisms. The time course of hydrolysis of the HA by commercially available bovinne testicular hyaluronidase (BTH) enzyme was observed in dependence on its molecular weight (MW) using a colorimetric method. Tested samples of HA with MW 1500 and 500 kDa and MW 531 and 150+148 kDa with low polydispersity were biotechnologically prepared at Contipro a.s. The obtained data confirmed that BTH has two pH optima of 3,5 and 5,4, concurrently they indicated that BTH degrades HA much faster in pH 3,5. The highest rate of BTH degradation was observed in MW 1500 kDa, while lower rate showed BTH in MW 150 + 148 kDa.

Kľúčové slová

hyaluronan, hyaluronidáza, bovinní testikulární hyaluronidáza, degradace, kolorimetrie, hyaluronidase, bovinne testicular hyaluronidase, degradation, colorimetry

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 13. 5. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 26. 6. 2019
• Vedúci: doc. Mgr. Lukáš Kubala, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry