Stanovení metabolické aktivity CYP1A2 pomocí kofeinu v moči a slinách

Bc. Stanislav Brejcha

Diplomová práce

Determination of metabolic activity of CYP1A2 using caffeine in urine and saliva

Anotace:

V klinické praxi často dochází k nežádoucím účinkům léčiv v důsledku jejich špatného dávkování. Těmto nežádoucím účinkům se dá předejít odhalením rychlosti jejich metabolismu biotransformačními enzymy. Mezi tyto enzymy patří cytochrom P450. Diplomová práce se zabývá biotransformační aktivitou formy CYP1A2 cytochromu P540. V rámci práce byla vypracována rychlá a dostatečně citlivá metoda RP-HPLC s DAD detekcí ke stanovení kofeinu (marker CYP1A2) a jeho 6 metabolitů. Tato metoda zahrnuje jednoduchou extrakci směsí chloroform:isopropanol v poměru 85:15 (v/v). Dále byly spočítány 3 metabolické poměry kofeinu a jeho metabolitů a prověřeny mezi nimi korelace. Metoda byla validována a testována na 16 subjektech a byla tak ověřena její použitelnost v klinické praxi a farmakologickém výzkumu.

Abstract:

In clinical practice, adverse effects of drugs appear very frequently, notably as a consequence inappropriate dosing. The determination of the rate of drug metabolism by biotransformation enzymes can prevent at least some of these side effects. Cytochrome P450 play the pivot role in the drug biotransformation processes. This thesis deals with biotransformation activity of form CYP1A2 of cytochrome P450. Rapid and sensitive RP HPLC method with DAD detection for determination of caffeine and its 6 metabolites was developed. This method involves a simple extraction with mixture of chlorophorm:isopropanol 85:15 (v/v). This method was validated and subsequently tested on 16 healthy volunteers and thus it was verified applicability in clinical practice and pharmacological research. Three different metabolic ratios of caffeine and its metabolites were calculated and correlations were found between urinary and salivary metabolic ratios.

Klíčová slova

Léčiva, metabolismus, cytochrom P450, CYP1A2, HPLC, markery, kofein, metabolický poměr, Drugs, metabolism, cytochrome P450, markers, caffeine, metabolic ratio

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 14. 5. 2015

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 2. 6. 2015
• Vedoucí: doc. PharmDr. Jan Juřica, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Analytická biochemie