Testování různých expresních podmínek pro produkci mykobakteriálních glykosyltransferas

Mgr. Markéta Lukášová

Bakalářská práce

Investigation of different expession conditions for mycobacterial glycosyltransferases production

Anotace:

Tuberkulóza je velmi závažné onemocnění způsobené převážně bakterií Mycobacterium tuberculosis. Jelikož je M. tuberculosis patogenní organismus, vyžaduje si tedy určitá opatření při testování, aby se zabránilo jeho šíření. Využívá se tzv. rekombinantní metoda, která umožňuje bezpečné studium jeho proteinů. Při této metodě je gen vnesen do vhodného vektoru a exprese se provádí v hostitelských buňkách. Tato bakalářská práce byla zaměřená na testování různých podmínek pro produkci glykosyltransferas za použití E.coli jako hostitelského organismu. Největší pozornost byla věnována Rv3782, galaktofuranosyltransferase, která se účastní výstavby buněčné stěny M.tuberculosis. Mým cílem je získat Rv3782 v cytosolu a otestovat různé podmínky exprese. Toho se snažím dosáhnout za použití různých chaperonových systémů.

Abstract:

Tuberculosis is a very serious disease, caused mainly by Mycobacterium tuberculosis. Because the pathogenic organism M. tuberculosis, thus requiring a certain action in testing, to prevent its spread. It uses the called recombinant method that allows the safe study of proteins. In this method, the gene is introduced into a suitable vector and expression is carried out in host cells. This thesis was aimed at testing different conditions for the production of glycosyltransferases using E. coli as a host organism. The greatest attention was paid Rv3782, galactofuranosyltransferases who is involved in cell wall construction M.tuberculosis. My goal is to get Rv3782 in the cytosol and to test various conditions of expression. I try to achieve this by using different system´s of chaperon.

Klíčová slova

tuberkulóza, glykosyltransferasy, galaktosyltransferasy, Rv3782, chaperony, plazmidy, exprese v E.coli, vektor pRSET, Mycobacterium tuberculosis

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 11. 5. 2010

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 14. 6. 2010
• Vedoucí: prof. RNDr. Michaela Wimmerová, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie