Studium mitochondriální toxicity v buněčných modelech

Kateřina Bužíková

Diplomová práce

Study of mitochondrial toxicity in cell models

Anotace:

Tato práce studuje mitochondriální toxicitu v buněčných liniích s důrazem na určení vlivu nadměrné exprese (overexprese) proteinu 17β-HSD10 v transfekované buněčné linii (HEK293-HSD10). Overexprese tohoto proteinu byla zjištěna u neuronů postižených Alzheimerovou chorobou, která je spojována s mitochondriální dysfunkcí. Hlavním cílem této práce bylo posoudit vliv této overexprese proteinu 17β-HSD10 na životaschopnost buněk, cytotoxicitu a mitochondriální toxicitu. Aby bylo možné pozorovat vliv této overexprese na mitochondriální funkci byly tyto parametry u buněčných liniích posuzovány při kultivaci těchto buněčných kultur v prostředí bez glukózové suplementace, ve kterém byla tvorba buněčného ATP omezena pouze na mitochondriální oxidativní fosforylaci. Stanovením buněčné viability pomocí kvantifikace ATP byl porovnán vliv standardního kultivačního prostředí oproti vlivu kultivace v bez glukózovém prostředí. Cytotoxicita byla hodnocena stanovením buněčné integrity a sledovala vliv specifického kultivačního prostředí a overexprese na buněčné kultury. Poslední byla stanovována mitochondriální toxicita, která kombinuje výsledky stanovené membránové integrity s množstvím mitochondriálního ATP pro sledování změn v mitochondriální funkci. Výsledky této práce přináší jedinečné poznatky o mitochondriální dysfunkci vyvolané overexpresí proteinu 17β-HSD10. Závěry vyvozené z této práce představují další pokrok v procesu pochopení patogeneze mitochondriální dysfunkce u Alzheimerovy choroby.

Klíčová slova

Alzheimerova choroba, Mitochondriální dysfunkce, Buněčná viabilita, Cytotoxicita, Overexprese proteinu 17β-HSD10

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 25. 7. 2023

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 22. 8. 2023
• Vedoucí: Mgr. Monika Schmidt, Ph.D.
• Oponent: PharmDr. Ondřej Benek, Ph.D.

Univerzita Hradec Králové

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Chemie / Bioorganická chemie