Zavedení spektrofotometrického stanovení citrátů a oxalátů v moči do rutinního provozu klinické laboratoře

Martin FEJT

Bakalářská práce

Introduction of spectrophotometric determination of urinary citrates and oxalates into routine clinical laboratory testing.

Anotace:

Stanovení hladiny citrátů a oxalátů v moči má velký význam při diagnostice a následném monitorování pacientů s urolitiázou. Údaje o koncentraci těchto látek v moči spolu s dalšími metabolickými vyšetřeními pomáhají určit pravděpodobnost recidivy urolitiázy. Současně pomáhají lékařům k nalezení vhodných režimových opatření pro pacienty s touto chorobou. Tato bakalářská práce se zabývá zavedením stanovení citrátů a oxalátů do rutinního provozu klinické laboratoře. V teoretické části je nejprve stručně popsána problematika urolitiázy, její rozdělení, etiopatogeneze, léčba a profylaxe. Důraz je kladen na úlohu citrátů a oxalátů. Dále jsou charakterizovány jednotlivé druhy močových konkrementů a možnosti jejich analýzy. Následuje přiblížení procesu verifikace měřicího postupu a s ní spojených výkonnostních parametrů. Jsou zde též vyjmenovány a popsány související analytické vlastnosti metod. V rámci popisu zaváděcího procesu je stručně vysvětleno nastavení parametrů v laboratorním a nemocničním informačním systému. V laboratoři ÚKBH FN Plzeň jsme pro stanovení koncentrace citrátů a oxalátů v moči zvolili enzymatické metody a automatický analyzátor Beckman Coulter AU480. Teoretická část bakalářské práce tedy pokračuje popisem spektrofotometrie a fungování použitého přístroje. Vyzkoušeli jsme reagencie od zahraničních výrobců INstruchemie (Holandsko) a LTA (Itálie). Následuje vysvětlení principů metod od výše uvedených výrobců, ve stručnosti jsou uvedeny další možné způsoby stanovení těchto analytů. Pro rutinní použití byly vybrány reagencie od firmy INstruchemie. Jelikož tento výrobce již své metody na spektrofotometrech firmy Beckman Coulter validoval, proběhla na ÚKBH pouze jejich verifikace. Praktická část této bakalářské práce se zabývá nejprve přípravou reagencií k analýze a pokračuje naprogramováním parametrů jednotlivých metod do analyzátoru. Hlavní náplní této práce je zevrubný popis provedení jednotlivých fází analýz, jež jsou vyžadovány verifikačním procesem. Po úspěšném dokončení všech měření a vyhodnocení jejich výsledků byly vypracovány příslušné verifikační protokoly a metody uvedeny do rutinního provozu laboratoře.

Abstract:

Determination of the level of citrates and oxalates in urine is of great importance in the diagnosis and subsequent monitoring of patients with urolithiasis. Data about urine concentrations of these substances, together with other metabolic tests, help to determine the likelihood of recurrence of urolithiasis. At the same time, they help physicians find appropriate regime measures for patients with the disease. This bachelor thesis deals with the introduction of the determination of citrates and oxalates in the routine operation of a clinical laboratory. The theoretical part first briefly describes the issue of urolithiasis, its distribution, etiopathogenesis, treatment and prophylaxis. Emphasis is placed on the role of citrates and oxalates. Furthermore, individual types of urinary stones and possibilities of their analysis are characterized. The following is an approach to the process of verification of the measuring procedure and associated performance parameters. The related analytical properties of the methods are also listed and described here. Within the description of the implementation process the setting of parameters in the laboratory and hospital information system is briefly explained. In the laboratory of ÚKBH FN Plzeň we chose enzymatic methods and an automatic analyzer Beckman Coulter AU480 to determine the concentration of citrates and oxalates in urine. The theoretical part of the bachelor thesis continues with a description of the spectrophotometry and operation of the instrument used. We tested reagents from foreign manufacturers INstruchemie (Netherlands) and LTA (Italy). The following is an explanation of the principles of the methods from the above manufacturers and briefly lists other possible methods for the determination of these analytes. Reagents from INstruchemie were selected for routine use. As this manufacturer has already validated its methods on Beckman Coulter spectrophotometers, only their verification has taken place at ÚKBH. The practical part of this bachelor thesis deals first with the preparation of reagents for analysis and continues with programming the parameters of individual methods into the analyzer. The main content of this work is a detailed description of the implementation of individual phases of analysis, which are required by the verification process. After successful completion of all measurements and evaluation of their results, appropriate verification protocols were prepared and the methods were put into routine operation of the laboratory.

Klíčová slova

Citrát, oxalát, urolitiáza, spektrofotometrie, analytické vlastnosti metod, analyzátor Beckman Coulter AU480, enzymatické stanovení, verifikace

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 11. 8. 2020

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: PharmDr. Michal Vostrý

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Zdravotně sociální fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Specializace ve zdravotnictví / Zdravotní laborant