Somatické buňky v kozím mléce

Bc. Jana Hrubá

Master's thesis

Somatic Cells in Goat Milk

Abstract:

Mléko je potravina živočišného původu, jejíž konzumace může být pro lidské zdraví prospěšná, protože představuje nejen významný zdroj bílkovin, ale i dalších látek (CLA, bioaktivních peptidů, vápníku aj.), které mohou mít pozitivní vliv na zdraví člověka. Mléko určené k lidské výživě musí splňovat legislativní podmínky, týkající se mikrobilogické kvality mléka, které zajišťují, že jeho konzumací nedojde k poškození zdraví konzumenta. Vedle mléčných bílkovin a tuku, které mají význam při zpeněžování mléka, je sledován i výskyt nežádoucích látek – např. reziduí antibiotik a sanitačních prostředků, toxinů. Ukazatelem kvality mléka, zejména v mléce kravském, je i tzv. počet somatických buněk (PSB), který je vyjadřován jako obsah somatických buněk v 1 ml mléka. PSB je monitorován zejména v souvislosti s možným výskytem onemocnění mléčné žlázy – mastitidy. Příznakem tohoto zánětlivého onemocnění může být zvýšený počet PSB. Mastitida je způsobena patogenními mikroorganismy, např. Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae a Streptococcus dysgalactiae. Kozí mléko má, v porovnání s mlékem kravským, přirozeně vyšší PSB. Tento jev je přisuzován apokrinní sekreci mléka. Zvýšený PSB v mléce může ovlivňovat jak technologické, tak senzorické vlastnosti mléka, působením enzymů somatických buněk, které mohou tyto vlastnosti ovlivňovat. V této práci byl u 57 vzorků mléka, od plemene koza bílá krátkosrstá, stanoven celkový PSB (přístrojem DeLaval®) a pomocí průtokové cytometrie diferenciální počet somatických buněk, tj. zastoupení jednotlivých buněčných subpopulací: epiteliálních buněk a leukocytů, konkrétně lymfocytů, makrofágů a polymorfonukleárních neutrofilů. Dále byl pomocí přístroje DairySpecFT stanoven obsah bílkovin, pomocí HPLC s DAD detektorem byl stanoven obsah kaseinových frakcí: αs1-kaseinu, αs2-kaseinu, β-kaseinu a κ-kaseinu. Bylo potvrzeno, že celkový i diferenciální PSB v kozím mléce je rozdílný v závislosti na individuálních vzorcích mléka. Ze stanovených buněčných subpopulací vykazovaly nejvyšší výskyt i nejnemší proměnlivost v zastoupení polymorfonukleární neutrofily. Největší vliv PSB na obsah bílkovin byl pozorován ve skupině s nejvyšším naměřeným PSB 1 500–3 000 × 103 buněk/ml mléka.

Abstract:

Milk is food of an animal origin whose consumption could be beneficial for human ´s health, not only for an important source of protein, but also for other substances (e.g. CLA, bioactive peptides, calcium etc), that could have a positive effect on human ´s health. Milk which is intended for human consumption must meet legislative conditions, regarding the microbiological quality of milk, which declares that its consumption does not harm the health of consumer. In addition to milk proteins and fat, which are important in the monetarization of milk, the occurence of undesirable substances is also monitored – e.g. residues of antibiotics and sanitizing agents, toxins. An indicator of milk quality, especially in cow ´s milk, is somatic cell count (SCC). SCC is expressed as the content of somatic cells in 1 ml of milk. SCC is monitored especially in connection with the possible occurence of disease of the mammary gland – mastitis. An increased number of SCC can be a symptom of this inflammatory disease. Mastitis may caused by pathogenic microorganisms such as Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, and Streptococcus dysgalactiae. Goat ´s milk has a naturally higher SCC compared to cow ´s milk. This phenomenon is connected to the apocrine secretion of milk. Increased SCC in milk could affect both technological and sensory properties of milk, through the action of somatic cell ´s enzymes. These enzymes could effect these properties. In this work were analysed 57 milk samples by the short-haired white goat breed. The total SCC and the differential of somatic cells, i.e. representation of individual cell subpopulations: epithelial cells and leukocytes, specifically lymphocytes, macrophages and polymorphonuclear neutrophils, were analyzed by flow cytometry. The content of protein was determined by DairySpecFT and the content of caseins fractions: αs1-casein, αs2-casein,β-casein and κ-casein was determined using HPLC with DAD detector. Both total and differential SCC in goat milk were confirmed to be different depending on individual milk samples. In representation of all determined cell ´s subpopulations, polymorphonuclear neutrophils showed the highest incidence and the lowest variability. The greatest effect of SCC on protein content was observed in the group with highest measured SCC 1 500–3 000 × 103 cells/ml milk.

Keywords

diferenciální počet somatických buněk, HPLC, lymfocyty, kaseinové bílkoviny, polymorfonukleární neutrofily, průtoková cytometrie

Keywords

HPLC, lymphocytes, casein proteins, polymorphonuclear neutrophils, flow cytometry, differential of somatic cells

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 17. 4. 2023

Thesis defence

• Date of defence: 17. 5. 2023
• Supervisor: Ing. Matyáš Orsák, Ph.D.
• Reader: Veronika Legarová, Ph.D.

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Master programme:
Food and Nutrition