Příprava rekombinantní kukuřičné nukleotidpyrofosfatasy za účelem ověření její participace na metabolismu cytokininů

Michaela BAKOVÁ

Bakalářská práce

Preparation of recombinant nucleotide pyrophosphatase from maize to verify its contribution to cytokinin metabolism.

Anotace:

Cytokininy jsou rostlinné hormony ovlivňující řadu fyziologických procesů. Pro biosyntézu cytokininů jsou popsány dvě základní dráhy ? dráha přímá, pro biosyntézu isopentenyladeninu a trans-zeatinu, a dráha nepřímá, kterou vzniká cis-zeatin. Dalším možným způsobem vzniku tZ se zdála být také isomerace cis-zeatinu na trans-zeatin pomocí hypotetické zeatin cis-trans isomerasy. Nedávno byl tento enzym anotován jako nukleotidpyrofosfatasa/fosfodiesterasa. Cílem této bakalářské práce bylo přenést gen hypotetické zeatin cis-trans isomerasy do vektoru pro expresi v rostlinách (pGWB17) a určit jeho význam při isomeraci zeatinu. Gen byl exprimován v rostlinách rajčete Enzym byl extrahován a pomocí metody HPLC byla měřena jeho aktivita. Potvrdila se funkce enzymu jako katalyzátoru při isomeraci cis-zeatinu na trans-zeatin.

Abstract:

Cytokinins are plant hormones involved in many physiological processes. There are two pathways described for biosynthesis of cytokinins ? a direct pathway for biosynthesis of isopentenyladenin and trans-zeatin and indirect pathway to form cis-zeatin. Isomeration of cis- zeatin to trans-zeatin by hypothetical zeatin cis-trans isomerase is another possible source of trans-zeatin. Recently, the enzyme was annotated as nucleotidpyrophosphatase/phosphodiesterase. The aim of this bachelor work was to transfer the gene for hypothetical zeatin cis-trans isomerase into a vector for expression in plants (pGWB17) and to determine its role in the isomerization of zeatin. The gene was expressed in tomato plants. The enzyme was extracted and its activity was measured using the HPLC method. This confirmed the function of the enzyme as a catalyst for the isomerization of zeatins.

Klíčová slova

Cytokininy, biosyntéza cytokininů, zeatin cis-trans isomerasa, nukleotidpyrofosfatasa/fosfodiesterasa

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 19. 8. 2013

Zveřejnit od: 19. 8. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Tomáš Hluska

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie