Úloha NADPH oxidázy při tvorbě volných radikálů a modifikace proteinů

Bc. Eliška PRŮDKOVÁ

Diplomová práce

Role of NADPH oxidase in free radical generation and protein modification

Abstract:

Monocytes, pivotal players in the immune system, differentiate into macrophages, a significant aspect of immune regulation. Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase, also known as NOX, plays a crucial role in generating reactive oxygen species (ROS) from molecular oxygen (O2), influencing macrophage polarization. This study aims to elucidate NADPH oxidase and its isoforms concerning ROS generation, protein modifications, and their association with oxidative stress and pathological processes. We investigated ROS formation and protein modifications during macrophage differentiation induced by phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and ascorbic acid. PMA, a potent activator of protein kinase C (PKC), and ascorbic acid, a well-known antioxidant, possess pro-oxidative capabilities. Observed morphological changes and NADPH oxidase expression suggest that monocytes may transform into ROS-producing macrophages in response to inflammation or differentiation. Alongside monocyte polarization into macrophages, we examined NOX2 expression during this transformation and the level of protein modification.

Abstract:

Monocyty, klíčové subjekty imunitního systému, se diferencují v makrofágy, což je významný aspekt imunitní regulace. Nikotinamidadenindinukleotidfosfát (NADPH) oxidáza, známá také jako NOX, hraje klíčovou roli při tvorbě reaktivních forem kyslíku (ROS) z molekulárního kyslíku (O2), což ovlivňuje polarizaci makrofágů. Cílem této studie je objasnit NADPH oxidázu a její izoformy, pokud jde o tvorbu ROS, modifikace proteinů a jejich souvislost s oxidačním stresem a patologickými procesy. Zkoumali jsme tvorbu ROS a modifikace proteinů během diferenciace makrofágů vyvolané působením fórbol 12-myristát 13-acetátu (PMA) a kyseliny askorbové. PMA, silný aktivátor proteinkinázy C (PKC), a kyselina askorbová, známý antioxidant, mají prooxidační schopnosti. Pozorované morfologické změny a exprese NADPH oxidázy naznačují, že monocyty se mohou v reakci na zánět nebo diferenciaci přeměnit na makrofágy produkující ROS. Současně s polarizací monocytů na makrofágy jsme zkoumali expresi NOX2 během této přeměny a úroveň modifikace proteinu.

Keywords

Buňky U-937, NADPH oxidázy, volné radikály, oxidativní stress, monocyty, makrofágy, konfokální laserová skenovací mikroskopie, malondialdehyd.

Jazyk práce: angličtina

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 30. 4. 2024

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Ankush Prasad, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biotechnologie a genové inženýrství / Biotechnologie a genové inženýrství