Studium vlivu ionizujícího záření na životnost NK buněk

Bc. Kamila Grochalová

Master's thesis

The study of NK cells viability influenced by ionizing radiation

Abstract:

Tato diplomová práce se zabývá vlivem ionizujícího gama záření na životnost NK buněk v periferní krvi potkana. Vliv IZ gama je zkoumán v souvislosti biologickou dozimetrií. Byly porovnávány změny procentuálního zastoupení živých buněk v závislosti na dávce IZ a čase při dvou experimentálních uspořádáních. První uspořádání bylo in vivo ozáření, po kterém následovala ex vivo kultivace. Druhým použitým experimentálním uspořádáním bylo in vitro ozáření. Metodickým postupem pro tuto studii byla mnohobarevná průtoková cytometrie, která byla zaměřená na detekci apoptózy. Pro identifikování NK buněk a B-lymfocytů byly použity monoklonální protilátky. Jako ukazatel apoptózy nám sloužil Annexin V a propidium jodid. U NK buněk izolovaných z periferní krve potkana byla prokázána vyšší radiorezistence v porovnání s B-lymfocyty. Nižší indukce apoptózy byla u NK buněk potvrzena v obou experimentálních uspořádáních.

Abstract:

This thesis examines the influence of ionising gamma radiation on NK cells viability in periferal blood of rat. Effect of ionising gamma radiation is studied in context of biological dosimetry. The changes of percentage in living cells depending on dose of irradiation and time in two experimental arragement were compared. The first experimental arragement was in vivo irradiation, followed by ex vivo culturing. The second experimental arrangement was used in vitro exposure. The multicolor flow cytometry focused on apoptosis detection was used in this study as methodical procedure. The monoclonal antibodies were used for identification of NK cells and B-cells. Annexin V and propidium iodid were used like a marker of apoptosis. In NK cells isolated from peripheral blood of rats was higher radioresistance demonstrated in comparison with B-cells. Lower apoptosis induction was in NK cells confirmed in both experimental configuration.

Keywords

NK buňky, ionizující gama záření, apoptóza, průtoková cytometrie

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 7. 5. 2015

Thesis defence

• Date of defence: 2. 6. 2015
• Supervisor: Mgr. Lenka Zárybnická, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Special Chemical and Biological Programmes / Bioanalyst