Využití metody Mini-FLOTAC pro diagnostiku infekcí gastrointestinálními helminty u drobných zemních savců

Bc. Eliška Skálová

Diplomová práce

Mini-FLOTAC as a new diagnostic tool for gastrointestinal helmint infections in small terrestrial mammals

Anotace:

Mini-FLOTAC je inovativní koprologická metoda pro diagnostiku gastrointestinálních helmintů, která je mnohými parazitology doporučována jako vhodná alternativa metody Simple McMaster. Mnoho odborníků ve svých studiích v posledních letech testuje spolehlivost této metody pro využití u různých druhů obratlovců. Cílem této práce bylo ověřit vhodnost a relevantnost metody Mini-FLOTAC pro diagnostiku propagačních útvarů gastrointestinálních helmintů parazitujících u hlodavců. Toho bylo dosaženo pomocí umělé inokulace vzorků původně negativních exkrementů laboratorního potkana předem definovanými koncentracemi (50, 100, 1000) vajíček tasemnice Hymenolepis diminuta (každá koncentrace po deseti opakováních) a porovnání výsledků Mini-FLOTAC s výsledky Simple McMaster. Druhou částí experimentu byla detekce vajíček helmintů u volně žijících drobných zemních savců, přičemž kontrolní metodou k tomuto vyšetření byl přímý nález parazitů v trávicím traktu během parazitologické pitvy. Zjištěná spolehlivost této techniky pro diagnostiku helmintů drobných zemních savců zdaleka nedosáhla takového stupně, který uvádějí ostatní studie pro jiné hostitele. Při diagnostice Hymenolepis diminuta u uměle infikovaných vzorků dosáhla u Mini-FLOTAC a Simple McMaster preciznost (vyjádřená pomocí variačního koeficientu) 57 % a 40 %, přesnost (průměr/koncentrace*100) činila 58 % pro Mini-FLOTAC a 93 % pro metodu Simple McMaster. Koncentrace vajíček přitom neměla vliv na výsledek. U volně žijících drobných savců bylo dosaženo nejvyšší spolehlivosti při detekci vajíček rodu Trichuris, konkrétně 56 %. Naopak nejmenší spolehlivost vykazovala metoda při detekci vajíček třídy Cestoda, kdy bylo zachyceno pouze 12 % pozitivních jedinců. U rodu Heligmosomum odpovídala spolehlivost 14 %, u rodu Heligmosomoides 15 %, u oxyuridních hlístic 14 %. Celkem spolehlivost metody Mini-FLOTAC činila 20 %. Výsledky této práce ukázaly, že metoda Mini-FLOTAC není vhodnou metodou pro detekci propagačních útvarů gastrointestinálních helmintů parazitujících u hlodavců. Jedním z hlavních problémů bylo nedostatečné množství vzorku běžně získávané od jednoho hostitele potřebné pro naplnění jedné komory disku, dále špatná čitelnost u některých vzorků a tvorba vzduchových bublin, které zvyšovaly riziko chybovosti.

Abstract:

Mini-FLOTAC is an innovative coprological method of gastrointestinal helminths diagnosis, recommended by a large number of parasitologists as a suitable alternative to Simple McMaster method. Recently, numerous experts have verified the reliability of this method using a wide range of vertebrate host species in their studies. The aim of this thesis was to verify suitability and reliability of the Mini-FLOTAC method for the diagnostics of parasitic elements of gastrointestinal helminths parasitic in rodents. The aim was achieved by means of sample artificial spiking with (pre)defined concentrations of Cestoda Hymenolepis diminuta eggs (50, 100, 100) with 10 replicates and Mini-Flotac and McMaster results comparison. The second part of the experiment was a detection of helminths eggs in small terrestrial mammals, where a direct parasite finding during post-mortem examination of digestive tract was used as a control method. Ascertained reliability of this technique for diagnostics of helminths eggs in small terrestrial mammals did not reach the level stated for different hosts by other studies by far. Concerning the diagnostics of Hymenolepis diminuta in spiked samples the precision of Mini-Flotac and Simple McMaster coefficients of variation achieved 57 % and 40 %. Accuracy (mean/concentration*100) was 58 % for Mini-FLOTAC and 93 % for Simple McMaster. Egg concentration did not significantly influence the results. In small terrestrial mammals the highest reliability of eggs examination was accomplished with the genus Trichuris, specifically 56 %. On the contrary, the lowest eggs detection reliability was with the Cestoda class, only 12 % of positive specimen were detected. Concerning Heligmosomum sp., Heligmosomoides sp. and oxyurid nematodes the reliability was almost equal, reaching 14, 15 and 14%, respectively. Overall reliability of the Mini-FLOTAC method was 20 %. The thesis results showed that the Mini-FLOTAC method is not suitable for detection of propagational objects of gastrointestinal helminths in rodents. One of the crucial problems was an insufficient amount of samples obtained from one host necessary for one disc chamber fill. Furthermore, a poor reading ability and an occurrence of air bubbles in some samples have increased the risk of error.

Klíčová slova

koprologické vyšetření, flotace, EPG, GI helminti, hlodavec

Keywords

coprological examination, flotation, EPG, GI helminths, rodent

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 26. 4. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. Zuzana Čadková, Ph.D. DiS.

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Magisterský studijní program:
Zájmové chovy zvířat