Stanovení koncentrace fytohormonů v kořenové špičce Arabidopsis thaliana

Bc. Lucie HERICHOVÁ

Master's thesis

Determination of phytohormones in the root tip of Arabidopsis thaliana

Abstract:

Auxiny a cytokininy jsou rostlinné hormony, které se podílí na vývoji a růstu rostliny. Přestože jejich metabolismus a biosyntéza jsou již důkladně prozkoumány, doposud nebyly objasněny jednotlivé detaily na buněčné úrovni. Tato diplomová práce byla zaměřena na porozumění metabolismu auxinů a cytokininů v kořenové špičce Arabidopsis thaliana. A proto cílem práce bylo vyvinout a optimalizovat metodu pro izolaci protoplastů a jejich třídění pomocí průtokové cytometrie. A s následnou purifikací fytohormonů a jejich měření pomocí kapalinové chromatografii ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií. Tato metoda byla déle testována na mutantních linií A. thaliana s fluorescenčně značenými buněčnými typy v kořenové špičce.

Abstract:

Auxins and cytokinins are plant hormones involved in plant development and growth. Although their metabolism and biosynthesis have been extensively studied, the details at the cellular level have not yet been elucidated. This thesis was focused on understanding the metabolism of auxins and cytokinins in the root tip of Arabidopsis thaliana. Therefore, the goal of this thesis was to develop and optimize a method for isolating protoplasts and sorting them using flow cytometry. And with subsequent purification of phytohormones and their measurement by liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry. This method was further tested on mutant A. thaliana lines with fluorescently labelled cell types in the root tip.

Keywords

Auxin, cytokinin, protoplast, FACS, purifikace, kořenová špička, Arabidopsis thaliana

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 17. 5. 2024

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Pavel Hladík

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Experimental Biology