Chromatografická izolace a frakcionace fosfopeptidů na stacionární fázi s oxidem titaničitým

Bc. Zuzana Dvořáková

Diplomová práce

Chromatographic Isolation and Fractionation of Phosphopeptides Using Titanium Dioxide Stationary Phase

Anotace:

Tato diplomová práce se zabývá izolací, purifikací a frakcionací fosfopeptidů mikrogradientovou chromatografií na kolonách se stacionární fází s oxidem titaničitým a následnou analýzou frakcí pomocí hmotnostní spektrometrie. K optimalizaci mikrogradientové separace a frakcionace fosfopeptidů na TiO2 mikrokuličkách byly použity jednoduché směsi peptidů trypticky naštěpených standardních proteinů -kaseinu, hovězího sérového albuminu a fosvitinu. Následně byla optimalizovaná separace vyzkoušena a ověřena pomocí celobuněčného lyzátu Jurkat buněk (T-buněčného lymfomu) naštěpeného trypsinem.

Abstract:

This thesis deals with microgradinet chromatography using titanium dioxide solid phase for isolation, purification and fractionation of phosphopeptides with mass spectrometry used for its analysis of fractions afterwards. Simple mixtures of digested standard proteins -casein, bovine serum albumin and phosvitin were used to optimization of microgradient separation and fractionation of phosphopeptides by TiO2 microparticles. Optimization of microgradient separation was tested and verified by trypsin digested lysat of Jurkat cells (T-cell lymphoma).

Klíčová slova

Fosfoprotein, fosfopeptid, obohacování, frakcionace, afinitní chromatografie, oxid titaničitý, hmotnostní spektrometrie

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 10. 5. 2019

Zveřejnit od: 31. 12. 2999

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: prof. RNDr. Zuzana Bílková, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Speciální chemicko-biologické obory / Bioanalytik