Klasifikace proteinurie elektroforézou moči a porovnání s kvantitativním stanovením proteinů v moči

Edita MELICHAROVÁ

Bachelor's thesis

Classification of proteinuria by urine electrophoresis and comparison with quantitative determination of proteins in urine

Abstract:

Úvod: Bakalářská práce se zaměřuje na vyšetření proteinurie, které zůstává jedním z důležitých základních vyšetření v nefrologii. Velmi důležitou roli má v brzké diagnostice nemoci ledvin, ve sledování jejich aktivity, odpovědi na léčbu a odhadu rizika vývoje selhání ledvin i kardiovaskulárního rizika. Metodika: Bylo vyšetřeno 100 vzorků sbírané moči za 24 hodin zaslaných na Oddělení klinické biochemie FNO s požadavkem na vyšetření proteinů v moči kvalitativními a kvantitativními metodami. Kvantitativní stanovení koncentrace albuminu (ALB-U), alfa1-mikroglobulinu (A1MGU), orosomukoidu (OROSU), transferinu (TRFU), imunoglobulinu G (IGGU), alfa2-makroglobulinu (A2MU) v moči bylo prováděno na analyzátoru BN ProSpec využívající jako měřící techniku nefelometrii a celkové bílkoviny v moči (TP-U) na biochemickém analyzátoru AU5800. Pro kvalitativní stanovení proteinurie pomocí diagnostické soupravy Hydragel Proteinurie bylo využito poloautomatického elektroforetického systému Hydrasys 2 SCAN Focusing. Statistické zpracování výsledných dat bylo provedeno v softwaru MedCalc a MS Excel. Výsledky: Studovaný soubor tvořilo 41 pacientů s fyziologickou proteinurii (FP), 17 s glomerulární selektivní proteinurii (GSP), 15 s glomerulární neselektivní proteinurii (GNP), 23 se smíšenou proteinurii (SP) a 4 pacienti s tubulární proteinurii (TP). Závislost jednotlivých bílkovin na typu proteinurie byla posuzována jednorozměrnou analýzou rozptylu (Kruskal-Wallisův test) na hladině významnosti P < 0,0001. Byl prokázán statistický významný rozdíl koncentrace TP-U mezi skupinami FP a GSP, GNP, SP, TP; A1MGU mezi skupinami FP a SP, TP; A2MU mezi FP a GNP, SP; ALB-U mezi skupinami FP a GSP, GNP, SP, TP; IGGU mezi skupinami FP a GSP, GNP, SP, TP; OROSU mezi skupinami FP a GSP, GNP, SP, TP a TRFU mezi skupinami FP a GSP, GNP, SP. Kappa statistika potvrdila průměrnou shodu mezi metodami kvalitativního (ELFO) a kvantitativního posuzování proteinurie (? = 0,506). Závěr: Elektroforéza proteinů v moči na agarózovém gelu umožňuje určení typu proteinurie a výsledky kvantitativního stanovení proteinů v moči nám umožňují její nález verifikovat. Současně na základě kappa statistiky lze konstatovat, že použité metody jsou navzájem zaměnitelné.

Abstract:

Objective: This bachelor thesis focuses on the examination of proteinuria, which remains one of the most important elementary examinations in nephrology. It has a very important role in the early diagnosis of kidney disease, in monitoring their activity, in responding to treatment, and in estimating the risk of developing kidney failure and cardiovascular risk. Material and methods: The study included 100 samples of urine collected in 24 hours sent to the Department of Clinical Biochemistry of FNO with the requirement for urine protein examination by qualitative and quantitative methods. Quantitative determination of albumin (ALB-U), alpha1-microglobulin (A1MGU), orosomucoid (OROSU), transferrin (TRFU), immunoglobulin G (IGGU), alpha2-macroglobulin (A2MU) in urine was performed on a BN ProSpec analyzer using nephelometry as a measurement technique and total protein (TP-U) on the AU5800 biochemical analyzer. Hydrasys 2 SCAN Focusing Semi-Automatic Electrophoretic System was used for qualitative determination of proteinuria using Hydragel Proteinuria diagnostic kit. Statistical processing of the resulting data was performed in MedCalc and MS Excel. Results: The study group consisted of 41 patients with physiological proteinuria (FP), 17 with glomerular selective proteinuria (GSP), 15 with glomerular non-selective proteinuria (GNP), 23 with mixed proteinuria (SP), and 4 patients with tubular proteinuria (TP). The dependence of individual proteins on the type of proteinuria was assessed by the analysis of one-way variance (Kruskal-Wallis test) at the significance level of P < 0.0001. There was a statistically significant difference in TP-U concentration between FP and GSP, GNP, SP, TP; A1MGU between FP and SP, TP; A2MU between FP and GNP, SP; ALB-U between FP and GSP, GNP, SP, TP; IGGU between FP and GSP, GNP, SP, TP; OROSU between FP and GSP, GNP, SP, TP and TRFU between FP and GSP, GNP, SP. Kappa statistics confirmed the average agreement between qualitative (ELFO) and quantitative assessment of proteinuria (? = 0.506). Conclusion: Urinary protein electrophoresis on agarose gel allows the determination of the type of proteinuria and the results of quantitative determination of urine proteins allow us to verify it. At the same time, based on kappa statistics, it can be stated that the used methods are interchangeable.

Keywords

Ledviny, proteiny v moči, elektroforetické metody, nefelometrie

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 30. 4. 2019

Accessible from:: 31. 12. 2999

Thesis defence

• Date of defence: 4. 6. 2019
• Supervisor: RNDr. Pavlína Kušnierová, PhD.

University of Ostrava

Faculty of Medicine

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Laboratory Assistant