Analytické metody pro studium obsahu estrogenů v krevní plazmě

Bc. Mirka Onderková

Master's thesis

Analytical methods for determination of estrogens in blood plasma.

Anotácia:

Cílem diplomové práce bylo zavést metodu stanovení estrogenů v krevním séru pomocí kapalinové chromatografie s hmotnostní detekcí do laboratorní praxe pracoviště RECETOX. Teoretická část je zaměřena na sledované estrogeny a jejich množství v tělních tekutinách, metody přípravy vzorků a matriční efekty. V praktické části jsou srovnány metody přípravy vzorků z hlediska výtěžnosti a vlivu matrice. Extrakce estrogenů na pevnou fází byla vybrána jako nejvhodnější. Tento postup přípravy vzorků byl ověřen na pěti typech krevního séra a byl vyhodnocen vliv matrice na stanovení estrogenů v séru z různých zdrojů. Limit detekce navržené metody pro všechny sledované estrogeny (E1, E2, E3, EE2) v krevním séru je přibližně 10 pg ml-1. V závěru práce jsou výsledky analýzy estrogenů krevního séra žen vyšetřovaných na onkologickém pracovišti. Obsah estronu v těchto vzorcích byl v rozmezí od 12 – 448 pg ml-1 a obsah β-estradiolu v rozmezí 16 – 463 pg ml-1.

Abstract:

The aim of this thesis was to introduce method for the determination of estrogens (E1, E2, E3, EE2) in the blood serum by liquid chromatography with mass spectrometry into praxis of laboratories of RECETOX. The theoretical part is focused on the estrogens and their quantity in body fluids, methods of sample preparation and matrix effects. In the experimental part of the methods of samples preparation are compared. Solid phase extraction of estrogens was selected as the most suitable one. The sample preparation procedure was tested on five types of blood serum and matrix effect was compared. The detection limit of proposed method in blood serum is approx. 10 pg ml-1. The method was aplied for analyzes of estrogens in blood serum of women on oncology. The content of estrone in investigated samples was in the range from 12 to 448 pg ml-1 and content of β-estradiol in the range from 16 to 463 pg ml-1.

Kľúčové slová

Estrogeny, steroidy, plazma, krevní sérum, tělní tekutiny, osud v prostředí, LC-MS, kapalinová chromatografie-hmotnostní spektrometrie.

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 17. 5. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 6. 6. 2013
• Vedúci: doc. RNDr. Zdeněk Šimek, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Chemistry / Environmental Chemistry