Fenotypová analýza zastoupení cirkulujících plazmocytů u monoklonálních gamapatií

Mgr. Renata Bezděková, Ph.D.

Doctoral thesis

Phenotypic analysis of circulating plasma cells frequency in monoclonal gammopathies

Abstract:

Cirkulující plazmocyty (cPC) jsou vcelku běžným nálezem u monoklonálních gamapatií. Vzhledem k tomu, že se vesměs jedná o nepočetně zastoupenou populaci, tyto nemusí být zachyceny nízce senzitivními přístupy a také jejich přínos k prognóze pacientů je stále řešen. Pomocí polychromatické průtokové cytometrie bylo stanoveno zastoupení a analyzován imunofenotyp cPC a dřeňových plazmocytů (PC) u mnohočetného myelomu (MM) a plazmocelulární leukémie (PCL). Získané výstupy byly korelovány s klinickým stavem pacientů a byla ověřena jejich prognostická hodnota. Bylo zjištěno, že počet cPC je významný prognostický faktor ovlivňující PFS i OS, kdy přítomnost ≥2,88 % cPC je nezávislým prognostickým faktorem pro OS a přítomnost již ≥0,24 % cPC je nezávislým prognostickým faktorem pro PFS. Navíc exprese vybraných markerů má vztah k extramedulárnímu šíření PC a pacienti bez cPC mají prognosticky příznivější fenotypový profil ve srovnání s pacienty s přítomnými cPC. Průtoková cytometrie byla potvrzena jako jednoznačná metoda volby v diagnostice PCL, jelikož ve srovnání s morfologií dokázala správně identifikovat všechny cPC. Dále fenotypový profil PC u pPCL a sPCL se významně liší pouze v expresi CD20, kdy nepřítomnost CD20 na PC u PCL je asociována s vyšším rizikem úmrtí. A tedy průtoková cytometrie by se měla stát nezbytnou součástí diagnostiky u pacientů s monoklonálními gamapatiemi, jakožto neinvazivní přístup využitelný dále k monitorování jejich stavu a potenciálního vývoje onemocnění.

Abstract:

Circulating plasma cells (cPC) are a quiet common finding in monoclonal gammopathies. As they are mostly present in small numbers, these may not be identified by low-sensitivity approaches. Also, their contribution to patient’s prognosis is still under investigation. The enumeration and phenotype profile of cPC and bone marrow plasma cells (PC) in multiple myeloma (MM) and plasma cell leukemia (PCL) was determined by polychromatic flow cytometry. The obtained results were correlated with the clinical condition of the patients and their prognostic value was verified. The number of cPCs was found to be a significant prognostic factor influencing both PFS and OS, moreover the presence of ≥2.88% cPC was an independent prognostic factor for OS and the presence of ≥0.24% cPC was an independent prognostic factor for PFS. In addition, the expression of selected markers is related to the extramedullary spread of PC, and patients without cPC have prognostically a more favorable phenotypic profile compared to patients with present cPC. Flow cytometry was confirmed as the unambiguous method of choice in the diagnosis of PCL, because it was able to correctly identify all cPCs compared to morphology. Above that, the phenotypic profile of PC in pPCL and sPCL differs significantly only in CD20 expression, where the absence of CD20 on PCs in PCL was associated with a higher risk of death. Thus, flow cytometry should become an essential part of the diagnostics of patients with monoclonal gammopathies, as a non-invasive approach that can be further used to monitor their condition and potential disease development.

Keywords

Mnohočetný myelom, plazmocelulární leukémie, plazmocyt, průtoková cytometrie, prognóza

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 2. 9. 2021

Thesis defence

• Date of defence: 27. 10. 2021
• Supervisor: Mgr. Lucie Říhová, Ph.D.
• Reader: MUDr. Martin Špaček, Ph.D., doc. MUDr. Daniel Lysák, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Medicine

Doctoral programme / field:
Oncology and Hematology / Hematology