Imunochemická stanovení s použitím fluorescenčních nanočástic

Bc. Patrik Gereg

Diplomová práce

Immunochemical assays based on fluorescent nanoparticles

Abstract:

This diploma thesis studies immunochemical assay with fluorescent detection of human serum albumin (HSA). The immunoassay was made as ‘sandwich‘ fluoroimmunoassay on microtiter plate with surface treated for high protein affinity. Either traditional organic fluorophore (fluorescein) or up-to-date up-converting nanoparticles (UCNPs) were used as fluorescent label bound to the detection antibody. FIA with fluorescein was optimized – concentrations of biomolecules needed for proper reaction were determined. For the first time, conjugation of UCNPs and anti HSA antibody was achieved; conjugates were successfully tested in FIA.

Abstract:

Diplomová práce studuje imunochemické stanovení lidského sérového albuminu (HSA) s fluorescenční detekcí. Imunostanovení se realizovalo jako „sendvičové“ fluoroimunostanovení (FIA) na mikrotitrační desce upravené pro vysokou adsorpci proteinů. Jako fluorescenční značka navázaná na detekční protilátce se použil jednak tradiční organický fluorofor (fluorescein), jednak novodobé up-konvertující nanočástice (UCNPs). FIA s fluoresceinem byla optimalizována – určily se koncentrace biomolekul nutné pro správný průběh reakce. Poprvé bylo dosaženo konjugace UCNPs s protilátkou proti HSA a vzniklé konjugáty se úspěšně otestovaly pomocí FIA.

Klíčová slova

fluoroimunostanovení, fluorescence, lidský sérový albumin, HSA, fluorescein, up-konvertující nanočástice, UCNPs, konjugace, fluoroimmunoassay, human serum albumin, up-converting nanoparticles, conjugation, FIA

Jazyk práce: slovenština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 16. 5. 2018

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 6. 6. 2018
• Vedoucí: doc. RNDr. Petr Skládal, CSc.
• Oponent: Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie