Biologické účinky aditiv mikroplastů na sladkovodní organismy

Bc. Helena Pokorná

Bachelor's thesis

Biological effects of microplastic additives on freshwater organisms

Anotácia:

Tato práce se věnuje výskytu mikroplastů a jejich aditiv ftalátů ve sladkovodním prostředí a biologickým účinkům ftalátů na sladkovodní organismy. Práce se zaměřuje především na modelový sladkovodní organismus Daphnia magna. V teoretické části práce je blíže rozebrána problematika oxidativního stresu a indukce oxidativního stresu působením ftalátů u sladkovodních organismů. Práce se také zaměřuje na problematiku deregulace genů pro jaderné receptory u sladkovodních bezobratlých jako potenciálních markerů endokrinní disrupce. Praktická část je věnována přípravě vzorků a metodiky pro pozdější studii změn genové exprese u D. magna po expozici polyvinylchloridovým mikroplastům s obsahem di(2-ethylhexyl) ftalátu. Součástí práce je expozice D. magna těmto mikroplastům, izolace RNA z tkáně exponovaných jedinců a ověření účinnosti primerů pro geny zapojené do eliminace oxidativního stresu, genu pro jaderný receptor retinoidní X receptor a vybrané housekeeping geny. Primery budou později využity pro kvantifikaci transkriptu těchto genů prostřednictvím metody dvoukrokové RT-qPCR.

Abstract:

The thesis deals with the occurrence of microplastics and their additives phthalates in the freshwater environment, and the biological effects of phthalates on freshwater organisms. The thesis focuses mainly on the freshwater model organism Daphnia magna. In the theoretical part, the problematics of oxidative stress and oxidative stress induction due to phthalate exposure are discussed in more detail. The thesis also pays attention to the issue of the deregulation of genes for nuclear receptors in freshwater invertebrates, suggesting them as potential markers of endocrine disruption. The experimental part is dedicated to samples and methods preparation for later study of gene expression changes in D. magna after exposure to polyvinyl chloride microplastics containing di(2-ethylhexyl) phthalate. This part includes exposure of D. magna to the microplastics, RNA isolation from the tissue of exposed individuals, and efficiency evaluation of primers for genes involved in oxidative stress elimination, a gene for nuclear receptor retinoid X receptor, and selected housekeeping genes. Primers will be used in a later study to quantify the transcript of the genes by two-step RT-qPCR.

Keywords

Daphnia magna, mikroplasty, ftaláty, oxidativní stres, endokrinní disrupce, microplastics, phthalates, oxidative stress, endocrine disruption

Jazyk práce: English

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 1. 6. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 9. 7. 2021
• Vedúci: Mgr. Jana Vašíčková, Ph.D.
• Oponent: Bc. Eliška Kuchovská, Ph.D., Bc. Eliška Kuchovská, Ph.D., MSc

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry