Izolace thylakoidních membrán z jehlic smrku vhodných pro studium fotosyntézy

David BENEŠ

Bachelor's thesis

Isolation of thylakoid membranes from spruce needles for photosynthetic studies

Abstract:

V práci jsou popsány postupy izolace thylakoidních membrán z jehlic smrku ztepilého. Cílem této práce bylo optimalizovat postup zadané metodiky podle Holá a kol. (2012) tak, aby byla zachována maximální funkčnost fotosystému II (PSII), která byla kontrolována pomocí fluorescenčního parametru Fv/Fm a následné kontroly strukturně funkčního stavu PSII pomocí nízkoteplotních fluorescenčních spekter. Během izolace jsem se potýkal se sníženou fotochemickou účinností PSII u intaktní jehlice. Po odstranění tohoto problému byla vyizolována suspenze thylakoidních membrán s maximálním Fv/Fm = 0,701 podle přesně zadané metodiky. Bylo zjištěno, že nejdůležitějším krokem izolace je homogenizace, protože Fv/Fm se po tomto kroku výrazně nemění. Nízkoteplotní fluorescenční spektra ukázala, že se během izolace výrazně tvar spekter nemění. Vzhledem k intaktní jehlici dochází v různých částech izolace k posuvu maxim fluorescenčních pásů k nižším vlnovým délkám.

Abstract:

The thesis describes the isolation procedures thylakoid membranes of spruce needles. The aim of this work was to optimize the procedure specified methodology by Holá et al. (2012), in order to maintain maximum functionality of photosystem II (PSII), which was monitored using a fluorescence parameter Fv / Fm and follow-up of structurally functional state of PSII using low-temperature fluorescence spectra. During the isolation I struggled with reduced photochemical efficiency of PSII in intact needles. After removal of the problem was the purified suspension of thylakoid membranes with a maximum Fv / Fm = 0.701 by specific precise methodology. It was found that the most important step of isolation is homogenization because Fv / Fm after this step does not change significantly. Low-temperature fluorescence spectra showed that during the isolation significantly change the shape of the spectra. Since intact needle occurs in various parts of the isolation displacement maxima fluorescent bands to lower wavelengths.

Keywords

Thylakoidní membrána, fotochemická účinnost, PSII, fluorescenční parametr Fv/Fm, homogenizace, nízkoteplotní fluorescenční spektra, intaktní jehlice

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 21. 6. 2013

Accessible from:: 21. 6. 2013

Thesis defence

• Date of defence: 23. 8. 2013
• Supervisor: Mgr. Václav Karlický

University of Ostrava

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Applied Physics / Biophysics