Detekce polymorfismů v genech VKORC1 a CYP2C9 spojených s metabolismem warfarinu

Tereza SOVOVÁ

Bakalářská práce

Anotace:

Tato bakalářská práce se zabývá farmakogenetickým testováním polymorfismů v genech CYP2C9 a VKORC1 u pacientů indikovaných k antikoagulační léčbě. Jelikož warfarin vykazuje velmi úzké terapeutické okno a obrovskou interindividuální variabilitu v dávkování, je toto testování klíčové pro včasnou prevenci závažných krvácivých komplikací, objevujících se často již v iniciální fázi léčby. Hlavním cílem bylo osvojit si techniku izolace genomové DNA, molekulárně-genetickou diagnostiku vybraných alelických variant a statistické vyhodnocení nasbíraných dat. Teoretická část popisuje fyziologii koagulační kaskády a mechanismus účinku warfarinu. Dále se zaměřuje na patofyziologii sledovaných genů a rizika, která plynou z přítomnosti rizikových alel u pacienta. Význam je dále kladen na metody molekulárně-genetického vyšetření. Práce popisuje také možnosti prevence nežádoucích účinků, zejména úpravu dávkovacích algoritmů a celkovou personalizaci terapie. Praktická část se zaměřuje na laboratorní zpracování vzorků, identifikaci jednotlivých genotypů a následné vyhodnocení výsledků. Diagnostika probíhala amplifikací úseků DNA pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR) a následnou reverzní hybridizací na diagnostických proužcích. Výsledky analyzovaného souboru 60 českých pacientů se shodují s globálními daty. Výsledky také potvrzují důležitost správně provedeného farmakogenetického screeningu v klinické praxi, kde přispívá k zajištění bezpečné péče o pacienta a umožňuje předcházet závažným iatrogenním hemoragickým komplikacím.

Abstract:

This bachelor thesis deals with pharmacogenetic testing of polymorphisms in the CYP2C9 and VKORC1 genes in patients indicated for anticoagulant therapy. Since warfarin exhibits a very narrow therapeutic window and immense interindividual variability in dosing, this testing is crucial for the early prevention of serious bleeding complications, which often occur as early as the initial phase of treatment. The main objective was to master the technique of genomic DNA isolation, molecular genetic diagnostics of selected allelic variants, and statistical evaluation of the collected data. The theoretical part describes the physiology of the coagulation cascade and the mechanism of action of warfarin. Furthermore, it focuses on the pathophysiology of the monitored genes and the risks arising from the presence of risk alleles in the patient. Emphasis is also placed on molecular genetic testing methods. The thesis also describes possibilities for preventing adverse effects, especially the adjustment of dosing algorithms and overall personalization of therapy. The practical part focuses on the laboratory processing of samples, identification of individual genotypes, and subsequent evaluation of results. Diagnostics were performed by amplifying DNA segments using polymerase chain reaction (PCR) and subsequent reverse hybridization on diagnostic strips. The results of the analyzed cohort of 60 Czech patients are consistent with global data. The results also confirm the importance of correctly performed pharmacogenetic screening in clinical practice, where it contributes to ensuring safe patient care and enables the prevention of serious iatrogenic hemorrhagic complications.

Klíčová slova

Warfarin, farmakogenetika, polymorfismus, VKORC1, CYP2C9, antikoagulační terapie, PCR, personalizovaná medicína

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 30. 4. 2026

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 26. 5. 2026
• Vedoucí: Ing. Aneta Zlámalová

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Zdravotně sociální fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Laboratorní diagnostika / Laboratorní diagnostika