Analýza enzymové kinetiky pomocí elektrochemického kitu BVT-Palmsens

Bc. Ondřej Šabacký

Bakalářská práce

Enzyme kinetic analysis using the electrochemical kit BVT-Palmsens

Anotace:

Tato bakalářská práce se věnuje stanovení kinetických parametrů enzymových reakcí KM a Vlim metodou amperometrie. Jako modelový enzym pro stanovení těchto parametrů byla zvolena glukosaoxidasa z třídy oxidoreduktas. V praktické části této práce byly kinetické parametry nejdříve stanoveny amperometricky. Měření probíhala v míchaném uspořádání při různých teplotách. Substrátem enzymové reakce byla glukosa v roztoku s fosfátovým pufrem. Pro ověření byla provedena spektrofotometrická měření. Kinetické parametry KM a Vlim byly stanoveny metodami dvojnásobného reciprokého výnosu a nelineární regrese.

Abstract:

This bachelor thesis deals with determination of kinetic parameters of KM and Vlim of enzymatic reactions using amperometry method. The glucose oxidase of the oxidoreductase class was chosen as a model enzyme for determining these parameters. In the practical part of this thesis, kinetic parameters were first determined amperometrically. The measurements were carried out in a mixed arrangement at different temperatures. The enzyme reaction substrate was glucose in a phosphate buffer solution. Spectrophotometric measurements were performed to verify the results. Kinetic parameters KM and Vlim were determined by double reciprocal plot and nonlinear regression methods.

Klíčová slova

glukosaoxidasa, glukosidasa, amperometrie, enzymová kinetika, glucose oxidase, glucosidase, amperometry, enzyme kinetics

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 13. 5. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 25. 6. 2019
• Vedoucí: doc. RNDr. Petr Skládal, CSc.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie