Příprava transgenních rostlin s expresí fluorescenčně značených mitogen-aktivovaných proteinkinas

Petra RAŠMANOVÁ

Bachelor's thesis

Development of transgenic plants with expression of fluorescently labeled mitogen-activated protein kinases

Abstract:

Kaskády mitogen-aktivovaných proteinkinas fungují v rostlinách jako přenašeči signálu, který může být vyvolán různými podněty, jako například solným stresem, stresem vyvolaným suchem, stresem z těžkých kovů anebo také stresem vyvolaným patogeny, jako například bakteriemi nebo parazitickými houbami. Mitogen-aktivovaná proteinkinasa 3 je součástí těchto mitogen-aktivovaných proteinkinasových kaskád a je zapojena v indukované rezistenci vůči biotickému i abiotickému stresu. Cílem této práce bylo připravit transgenní rostliny s expresí fluorescenčně značené mitogen-aktivované proteinkinasy 3. Pro tento účel byly konstrukty pro C-terminální fúzi pMPK3::MPK3:mCherry ve vektoru pB7m34GW a pro N-terminální fúzi pMPK3::mCherry:MPK3 ve vektoru pB7m34GW použity pro transientní transformaci do listů Nicotiana benthamiana pomocí Agrobacterium tumefaciens. Následně byla provedena stabilní transformace těchto konstruktů do rostlin Arabidopsis thaliana ekotyp Columbia metodou floral dip a tato práce byla završena úspěšnou selekcí a mikroskopickou dokumentací T2 generace transgenních rostlin.

Abstract:

Mitogen-activated protein kinase cascades are involved in signal transduction in plants. The signal can be caused by various kinds of stimuli such as salt stress, drought stress, heavy metal stress or pathogen stress, like bacteria or fungi. Mitogen-activated protein kinase 3 is part of the mitogen-activated protein kinase cascades and is involved in induced resistance to biotic and abiotic stress. The aim of this thesis was to produce transgenic plants with expression of fluorescently labeled mitogen-activated protein kinase 3. For this purpose, constructs for C-terminal fusion pMPK3::MPK3:mCherry in a vector pB7m34GW and for N-terminal fusion pMPK3::mCherry:MPK3 in a vector pB7m34GW were used for Agrobacterium tumefaciens-mediated transient transformation of Nicotiana benthamiana leaves. Subsequently, those constructs were stably transformed into Arabidopsis thaliana plants, ecotype Columbia, by the floral dip method. The thesis was completed by successful selection and microscopic documentation of transgenic plants of T2 generation.

Keywords

MAPK, MPK3, Arabidopsis thaliana, Agrobacterium tumefaciens, transformace

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 2. 5. 2017

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Dominik Novák

PALACKÝ UNIVERSITY OLOMOUC

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biochemistry / Biotechnology and Gene Engineering