Fenotypová charakterizácia transgénnej línie Arabidopsis s annexínom 1 po abiotickom strese

Miroslava HRBÁČKOVÁ

Bakalářská práce

Phenotypic characterization of transgenic Arabidopsis annexin 1 line after abiotic stress.

Anotace:

Rastliny sú sesilné organizmy, ktoré si museli vyvinúť spôsoby na obranu pred nepriaznivými podmienkami prostredia. Annexíny sú membránové proteíny, ktoré sa podieľajú na odpovediach pri stresových podmienkach. Cieľom tejto bakalárskej práce bolo sledovanie zmien pri klíčení a raste koreňov Arabidopsis thaliana a porovnanie divokého typu Col-0 s transgénnymi líniami pMAT-GFP (cytoplasmatický fúzny proteín s GFP) a Ann1-GFP (annexín 1 značený s GFP pod kontrolou vlastného promótora) v podmienkach soľného a oxidatívneho stresu. Ďalším cieľom bolo štúdium zmien v expresii Ann1-GFP po pôsobení soľného stresu a inhibítorov mikrotubulov s použitím konfokálnej laserovej mikroskopie na in vivo lokalizácii a výsledky z in vivo lokalizácie po pôsobení soľného stresu boli potvrdené pomocou biochemickej immunoblotovej analýzy. Bol testovaný efekt soľného stresu a efekt inhibítorov MT pri in vivo lokalizácii. Pomocou imunofluorescenčného značenia tubulínu metódou "whole mount" bola sledovaná organizácia mikrotubulov v koreňoch klíčencov línie Ann1-GFP.

Abstract:

Plants are sessile organisms that have had to develop ways to defend against adverse environmental conditions. Annexin are membrane proteins that are involved in the responses under stress conditions. The main aim of my bachelor thesis was monitoring changes in germination and root growth of Arabidopsis thaliana and comparison of wild type Col-0 with transgenic lines pMAT-GFP (cytoplasmic fusion protein with GFP) and Ann1-GFP (annexin 1 labeled with GFP under the control of its own promoter) under conditions of salt and oxidative stresses. Another goal was to study changes in the expression of Ann1-GFP after application of salt stress and microtubule inhibitors, using confocal laser microscopy for in vivo localization. Moreover, overexpression of annexin 1 was detected in the transgenic line using biochemical immunoblot analysis. Organization of microtubules was studied in roots of Ann1-GFP line employing "whole mount" immunofluorescent labeling of tubulin.

Klíčová slova

Arabidopsis thaliana, annexín 1, soľný stres, oxidatívny stres, in vivo lokalizácia, cytoskelet

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 30. 4. 2015

Zveřejnit od: 30. 4. 2015

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Olga Šamajová, Dr.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biologie / Molekulární a buněčná biologie