Vizualizace oxidativního stresu v lidských buňkách

Bc. Eliška PRŮDKOVÁ

Bakalářská práce

Oxidative stress imaging in human cells

Abstract:

Tato studie se zabývá promonocytovou myeloidní buněčnou linií, která byla poprvé izolována z pleurální tekutiny histiocytárního lymfomu 37letého muže. Tato studie ukazuje, že během procesu diferenciace, která byla vyvolána pomocí induktoru diferenciace, forbol 12-myristát-13-acetátu (PMA), došlo k určitým morfologickým změnám, které ukazují přítomnost pseudopodií a adherenci buněk U937. Byla studována korelace mezi buněčnou diferenciací a tvorbou reaktivních forem kyslíku (ROS). Na základě konfokální laserové skenovací mikroskopie (CLSM) a elektronové paramagnetické rezonanční spektroskopie (EPR) bylo pozorováno, že během procesu se generují hydroxylové radikály (HO). Dále bylo zjištěno, že produkce ROS vedla k oxidaci proteinů, které byly identifikovány analýzou westernového přenosu s použitím 5,5-dimethyl-l-pyrrolin-N-oxidu (DMPO) protilátek. Využití makrofágů v této studii jako modelového systému doplňuje poznatky o produkci ROS a oxidační modifikaci biomolekul.

Abstract:

The current study deals with pro-monocytic myeloid cell line which was first isolated from the pleural fluid of histiocytic lymphoma of a 37-year-old man. This study shows that during the process of differentiation which was induced using differentiation inducer, phorbol 12-myristate-13-acetate (PMA), certain morphological changes occurred showing presence of pseudopodia and adherence of the U937 cells. The correlation between cell differentiation and generation of reactive oxygen species (ROS) was studied. Based on confocal laser scanning microscopy (CLSM) and electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy, it was observed that hydroxyl radical (HO) are generated during the process. Furthermore, it was found that ROS produced led to the oxidation of proteins which were identified bywestern blot analysis using 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO) antibodies. Utilizing macrophage as a model system, findings from the present study add to the current knowledge of ROS production and oxidative modification of biomolecules.

Keywords

Buňky U937, reaktivní formy kyslíku, oxidační stres, monocyty, konfokální, laserová skenovací mikroskopie

Jazyk práce: angličtina

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 28. 5. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 29. 6. 2021
• Vedoucí: Mgr. Ankush Prasad, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biotechnologie a genové inženýrství