Analýza minimální reziduální nemoci u leukémií a lymfomů metodou multiparametrické flowcytometrie

Ing. Olga Stehlíková, Ph.D.

Doctoral thesis

Analysis of minimal residual disease in leukemia and lymphomas using multiparameter flow cytometry

Abstract:

Úvod. Průtoková cytometrie (FCM) plní důležitou roli při diagnostice a monitoringu hematologických malignit. Její začátky jsou zaznamenávány již v padesátých letech dvacátého století. V současnosti jsou rutinně využívány metody FCM u chronických i akutních leukémií, lymfomů, malignit z plazmatických buněk, myelodysplastického syndromu, paroxysmální noční hemoglobinurie a dalších poruch leukocytárních buněk. Metody. V naší laboratoři jsme připravili a otestovali panel pro osmibarevnou FCM detekci minimální reziduální nemoci (MRD) u chronické lymfocytární leukemie (CLL) a dále také postupy pro hodnocení MRD u akutních leukémií (AL). Výsledky. Hodnoty MRD měřené FCM byly porovnávány s metodami molekulární biologie, z provedených analýz byla zjištěna korelace těchto metod u CLL nad 90 % u AL cca 80 %. Neshody mezi jednotlivými metodami jsou způsobeny významným rozdílem v jejich detekčních limitech. Závěr. Cílem práce bylo vyhledání vhodných metod pro FCM detekci MRD u AL a CLL z aktuálně dostupných publikací a jejich modifikace, testování a zavedení do klinické praxe naší laboratoře. V současné době využíváme standardizovanou analýzu MRD u CLL, která již byla akreditována a pro stanovení hodnot u AL využíváme individuálních vyšetřovacích panelů sestavených podle vstupního fenotypu daného pacienta.

Abstract:

Introduction. Flow cytometry (FCM) plays an important role in diagnostics and monitoring of haematological malignancies. Having emerged as early as the 1950s, FCM methods are currently routinely used in chronic and acute leukaemia, lymphomas, plasma cell malignancies, myelodysplastic syndromes, paroxysmal nocturnal hemoglobinuria and other leukocyte disorders. Methods. We have prepared and tested a panel for eight-colour FCM for the detection of minimal residual disease (MRD) in chronic lymphocytic leukaemia (CLL) and procedures for evaluating MRD in acute leukaemia (AL) in our laboratory. Results. MRD values measured with FCM were compared against results of molecular biology methods and the carried out analyses detected correlation between the two methods greater than 90% in CLL and approximately 80% in AL. Discrepancies between the individual methods are caused by the significant differences between their detection limits. Conclusion. The aim of our work was to search for suitable methods for FCM detection of MRD in AL and CLL based on the currently available publications and to modify the identified methods, test and introduce them in the clinical practice of our laboratory. We currently use a standardised MRD analysis in CLL, which has been accredited, and the values in AL are determined using individual examination panels created according to the patient’s initial phenotype.

Keywords

akutní lymfoblastická leukémie, akutní myeloidní leukemie, chronická lymfatická leukemie, kvantitativní průtoková cytometrie, minimální zbytková nemoc, průtoková cytometrie

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 24. 11. 2015

Thesis defence

• Date of defence: 21. 12. 2015
• Supervisor: prof. MUDr. Michael Doubek, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Medicine

Doctoral programme / field:
Oncology (4-years) / Oncology