Stanovení exprese mRNA transportních proteinů ABCG5 a ABCG8 u HHTg potkanů na dietě obohacené o přírodní látky

Dominika DOHNALOVÁ

Bachelor's thesis

Determination of ABCG5 and ABCG8 mRNA expression in HHTg rats on diet with natural compounds

Abstract:

Bakalářská práce se věnuje genovou expresí střevních transportérů ABCG5 a ABCG8 na úrovni mRNA u hereditárně hypertriglyceridemických potkanů, kteří byli na dietě obohacené o silymarin nebo n-3 polynenasycené mastné kyseliny nebo na kombinované dietě obsahující obě látky. V literárním přehledu je popsána problematika metabolického syndromu, který je charakterizován souborem rizikových faktorů způsobující kardiovaskulární onemocnění či diabetes mellitus druhého typu. Jedním z faktorů metabolického syndromu je hypercholesterolemie, tedy zvýšená plazmatická koncentrace cholesterolu. Pro homeostázu cholesterolu je důležitá správná funkce transportních proteinů ABCG5 a ABCG8, které se podílí na eliminaci cholesterolu z těla. Bylo zjištěno, že n-3 polynenasycené mastné kyseliny samotné, ale i v kombinaci se silymarinem, tedy extraktem z ostropestřce mariánského (Silybum marianum), zvyšují expresi mRNA jaterních transportérů ABCG5 a ABCG8. Ovšem otázkou je, zda ke stejnému efektu dochází i v tenkém střevě. Studie byla provedena na experimentálním zvířecím modelu metabolického syndromu hereditárně hypertriglyceridemických potkanech. Tato zvířata mají zvýšenou plazmatickou koncentraci triglyceridů a jejich popisu se věnuje i další část literárního přehledu V závěru první části práce jsou uvedeny metody studia exprese mRNA, především princip metody real-time PCR. Experimentální část se věnuje stanovení exprese mRNA genů Abcg5 a Abcg8 ve střevní tkáni potkana. Cílem práce bylo zjistit, jaká vliv má silymarin a n-3 polynenasycené mastné kyseliny na expresi mRNA střevních Abcg5 a Abcg8 a porovnat tento efekt s efektem pozorovaným u jaterních transportérů. Výsledky ukazují, že silymarin a n-3 polynenasycené mastné kyseliny nemají signifikantní vliv na expresi mRNA střevních transportérů ABCG5/8. Mechanizmus působení vybraných látek je tedy pravděpodobně složitější.

Abstract:

This bachelor's thesis deals with the mRNA expression of intestinal transporters ABCG5 and ABCG8 in hereditary hypertriglyceridemic rats that were fed on a diet supplemented by silymarin or n-3 polyunsaturated fatty acids or diet containing both substances. The issue of a metabolic syndrome is described in the literate review. It is characterized by many risk factors that can cause cardiovascular diseases or diabetes mellitus type II. One of those risk factors is hypercholesterolemia, the increased plasma concentration of cholesterol. The correct function of transporters ABCG5 and ABCG8 is important for cholesterol homeostasis. They help to get rid of cholesterol out of the body. It was recently observed that n-3 polyunsaturated fatty acids by themselves or combined with silymarin, an extract from Milk thistle (Silybum marianum), increase the mRNA expression of hepatic ABCG5 and ABCG8 transporters. But the question is, if the effect on intestinal transporters will be the same. The study was carried out on the animal experimental model of metabolic syndrome hereditary hypertriglyceridemic rats. They have an increased plasma concentration of triglycerides. One part of the literate review is focused on the characteristic of these animals. Methods used for the determination of mRNA expression, particularly the basic principles of the real-time PCR, are described at the end of the theoretical part. Experimental part is focused on determination of the mRNA expression of Abcg5 and Abcg8 genes in intestinal tissue of rats. The aim of the study was to determine the effect of silymarin and n-3 polyunsaturated acids on the mRNA expresion of intestinal Abcg5 and Abcg8 and compare this effect with the effect observed on the transporters in the rat liver. Results show that silymarin and n-3 polyunsaturated fatty acids have no significant effect on the mRNA expression of ABCG5/8 transporters in the rat intestine. The mechanism of action of selected compounds is probably more complicated.

Keywords

Transportní proteiny ABCG5 a ABCG8, silymarin, n-3 polynenasycené mastné kyseliny, metabolický syndrom, HHTg potkani, mRNA exprese, real-time PCR

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 4. 5. 2018

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Zuzana Matušková

PALACKÝ UNIVERSITY OLOMOUC

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biology / Molecular and Cell Biology