Expression and purification of \kur{Synechocystis} ferrochelatase from \kur{Escherichia coli}

Bc. Jitka KRUČINSKÁ

Diplomová práce

Anotace:

Ferochelatáza (FeCH) je všudypřítomný enzym produkující hem, který je nezbytný pro všechny žijící organizmy. Fotosyntetické organizmy syntetizují heme a chlorofyl společnou dráhou, ve které hraje FeCH významnou roli jako klíčový enzym pro regulaci obou větví. Vytvoření aktivní rekombinantní FeCH by bylo neocenitelné pro pochopení role FeCH v regulaci biosyntetické dráhy chlorofylu a hemu. Cílem této práce je exprimovat FeCH ze sinice Synechocystis 6803 v Escherichia coli a připravit protokol pro purifikaci tohoto proteinu ve formě vysoce aktivního enzymu.

Abstract:

Ferrochelatase (FeCH) is an ubiquitous enzyme producing heme, an essential pigment for all forms of organisms. In photosynthetic organism, heme is synthesized together with the chlorophyll in one branched pathway and the FeCH enzyme appears to be important for regulation of both the chlorophyll and the heme biosynthesis. To understand regulatory role of this protein, an active recombinant FeCH from photosynthetic organism would be invaluable. The aim of this project is to express FeCH from cyanobacterium Synechocystis 6803 in Escherichia coli and to prepare a protocol for the purification of this protein as a highly active enzyme.

Klíčová slova

exprese, purifikace, fúzní protein, ferrochelatáza

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 30. 4. 2009

Zveřejnit od: 30. 4. 2009

Identifikátor: 13357

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 29. 5. 2009
• Vedoucí: Ing. Roman Sobotka, Ph.D.

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biologie / Experimentální biologie