Stanovení oxidované a redukované formy kyseliny lipoové v lidské plazmě

Bc. Zuzana Heczková

Diplomová práce

The determination of oxidized and reduced form of lipoic acid in human plasma

Anotace:

Kyselina lipoová je sloučenina přírodního původu. Její obě formy, oxidovaná i redukovaná, si zachovávají antioxidační vlastnosti a mají protizánětlivé účinky in vivo a in vitro. Bylo prokázáno, že tento silný antioxidant hraje významnou roli při léčbě mnoha onemocnění, jejichž vývoj souvisí se zvýšeným oxidačním stresem např. diabetes mellitus a s ním spojené komplikace. V současné době se studie, zabývající se léčbou pomocí kyseliny lipoové, zaměřují na kardiovaskulární onemocnění. Kyselina lipoová totiž brání rozvoji aterosklerotických plátů snížením počtu zánětlivých buněk, snižuje obsah tuků a upravuje pružnost cévních stěn. Pro analýzu kyseliny lipoové lze využít mnoha metod. Avšak většina z nich je nevyhovující z důvodu jejich nedostatku citlivosti a specifity, potřeby nákladného analytického vybavení a časové náročnosti na přípravu vzorku. Cílem naší práce bylo pokusit se vypracovat vhodnou metodu, pomocí které bychom byli schopni simultánního stanovení oxidované i redukované formy kyseliny lipoové. Tento proces je velmi složitý a problematický a skládá se z jednotlivých dílčích kroků. Podařilo se nám určit vhodné podmínky redukce tak, aby byla maximální. Předmětem dalšího zkoumání bude zjištění stability kyseliny dihydrolipoové a zlepšení extrakce pomocí dichlormetanu.

Abstract:

The lipoic acid is a chemical compound of the natural origin. Both of its redox forms show antioxidant properties and anti-inflammatory effects in vivo and in vitro. It was proved that the lipoic acid plays an important role in a therapy of many diseases, which are related to enhanced oxidative stress. As an example we can name diabetes mellitus and other complications related to it. There are many studies nowadays dealing with using lipoic acid as treatment of cardiovascular diseases. The reason is that lipoic acid prevents development of atherosclerotic plaques by decreasing the number of inflammatory cells, reduces the amount of fats and regulates the flexibility of vessel walls. Many methods for analyzing lipoic acid are known. However, most of them are inconvenient, because they are not enough sensitive and specific; the accessories are expensive and also preparing samples lasts long. The aim of our project was to develop an appropriate method by which we were able to simultaneous determination of oxidized and reduced forms of lipoic acid. This process is very complicated and problematic, and consists of individual steps. We were able to establish appropriate conditions to reduce to the maximum. Subject to further study will establish the stability of dihydrolipoic acid and improve the extraction using dichlormethane.

Klíčová slova

kyselina lipoová, diabetes mellitus, ateroskleróza, HPLC, elektrochemická detekce

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 4. 5. 2011

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 31. 5. 2011
• Vedoucí: Mgr. Pavla Královcová, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Speciální chemicko-biologické obory / Analýza biologických materiálů