Úloha SNX9 v epiteliálně mesenchymálním přechodu u epiteliálních buněk prostaty.

Mgr. Petr Bednář

Bachelor's thesis

The role of SNX9 in epithelial mesenchymal transtion of prostate epithelial cells

Abstract:

Epiteliálně-mesenchymální přechod (EMT) je důležitý proces během embryonálního vývojem, ale vyskytuje se i během života v různých patologických formách od fibrózy po rakovinu. Nejčastější příčinou patologické formy EMT je deregulace signálních drah. Mezi signální dráhy schopné indukovat EMT patří i dráha Transformujícího růstového faktoru β. Epiteliální buňky během EMT ztrácí epiteliální vlastnosti a získávají vlastnosti buněk mesenchymálních. Zisk mesenchymálních vlastností během EMT u rakovinných buněk vede ke zvýšené schopnosti migrace a invazivity, což může vést k tvorbě metastáz. Protein Sorting nexin 9 (SNX9) hraje významnou roli při mnoha fundamentálních buněčných procesech. Mezi tyto procesy patří například endocytóza nebo transport komponentů adherentních spojů. Znalosti o funkcích SNX9 během patologických podmínek jsou limitovány, avšak je známo, že snížení exprese SNX9 vede u nádorů k agresivnějšímu průběhu onemocnění. Modulace exprese SNX9 by mohla vést k ovlivnění regulace EMT. Pro studium modulace exprese SNX9 a jeho vlivu na indukci EMT byla zvolena parentální linie BPH-1, která je netumorigenní, a transformovaná linie BPH-1 CAFTD03, která je tumorigenní. Exprese SNX9 byla modulována pomocí siRNA a EMT bylo indukováno pomocí TGF-β1. Použité metody studia byly Westernový přenos a analýza buněčného indexu na přístroji xCELLigence RTCA DP. Získané výsledky neprokazují u parentální linie BPH-1, že modulace exprese SNX9 vede k ovlivnění TGF-β1 indukovaného EMT. Avšak u linie CATFD03 výsledky ukazují, že snížená exprese SNX9 vede k posílení TGF-β1 indukovaného EMT.

Abstract:

Epithelial-mesenchymal transition EMT is fundamental proces during embryonal development, but also occurs during life in various patological forms such as fibrosis and cancer. The most common cause of patological form of EMT is deregulation of signaling pathways. Signaling pathways capable of inducing EMT include Transforming growth factor β (TGF-β) pathway. Epithelial cells lose during EMT their epithelial properties and gain properties of mesenchymal cells. Gain of mesenchymal characteristic during EMT in cancer cells results to increased migratory and invasive capabilities, which can lead to the formation of metastases.The sorting nexin 9 protein (SNX9) plays an important rolein various fundamental cellular processes such as endocytosis and trafficking of adherens junctions. The knowledge of SNX9 functions during patological conditions are limited, however it is known that decreased expression of SNX9 correlates with more aggressive progress of cancer. Modulation of SNX9 expression could influence regulation of EMT.To study modulation of SNX9 expression and its effect on the induction of EMT was chosen parental BPH-1 cells, that are nontumorigenic and transformed BPH-1 CAFTD03 cells, that are tumorigenic. Expression of SNX9 was modulated by siRNA and EMT was induced by TGF-β1. To study the modulation of SNX9 expression Western blot and cell index analysis on xCELLigence RTCA DP were used. The obtained results ,that parental BPH-1 cells with decreased expression of SNX9 influence TGF-β1 induced EMT, were unconvincing. However results of CAFTD03 cells with decreased expression of SNX9 show that decreased expression of SNX9 influence and strenghten TGF-β1 induced EMT.

Keywords

Epiteliálně-mesenchymální přechod, Sorting nexin 9, recyklace membránových receptorů

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 19. 5. 2014

Thesis defence

• Date of defence: 16. 6. 2014
• Supervisor: Mgr. Karel Souček, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biochemistry / Biochemistry