Vyšetření specifických IgG pomocí metody ELISA

Kamila BICANOVÁ

Bakalářská práce

Examination of specific IgGs with the ELISA method

Anotace:

Cílem této práce je stanovit hodnoty specifických IgG anti-SARS-CoV-2 pomocí metody ELISA u vybraných osob a zhodnotit, zdali je kit QuantiVac ELISA (IgG) vhodný ke stanovení. V teoretické části je bakalářská práce zaměřena na imunochemické metody. Imunochemické metody jsou založené na vzájemné interakci antigenu a protilátky. Díky imunochemickým metodám můžeme stanovit přítomnost specifických protilátek. Jednou z významných imunochemických metod je ELISA neboli Enzyme-linked immunosorbent assay. ELISA je speciálním druhem enzymové imunoanalýzy. Základním principem je interakce antigenu a protilátky za vzniku imunokomplexu. Aby byl tento imunokomplex měřitelný, musí se přidat konjugát, který způsobí barevnou reakci. Praktická část je zaměřená na vyšetření specifických protilátek třídy IgG proti SARS-CoV-2. Bylo vyšetřováno šestnáct vzorků lidského séra. Vyšetřované sérum bylo od osob různých věkových skupin. Séra byla od osob s očkováním, s očkováním a prodělaným onemocněním Covid 19, neočkovaných s prodělaným onemocněním Covid 19 anebo od neočkovaných osob co neprodělaly onemocnění Covid 19. Dále bylo měřeno šest kalibrátorů, pozitivní a negativní kontrola. Celkem bylo obsazeno 24 mikrotitračních jamek. Byla použita testovací sada Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA od firmy EUROIMMUN. Vše bylo měřeno pomocí fotometru DYNAREAD a zpracováno pomocí softwaru AlaDYN. Výsledkem byly různé hladiny protilátek. Z šestnácti vzorků sér vyšly 2 vzorky jako negativní, jeden vzorek vyšel jako hraniční a 13 vzorků vyšlo pozitivně.

Abstract:

The aim of this study is to determine the levels of specific IgG anti-SARS-CoV-2 by ELISA in selected individuals and to evaluate whether the QuantiVac ELISA (IgG) kit is suitable for the determination. In the theoretical part, the bachelor thesis focuses on immunochemical methods. Immunochemical methods are based on the interaction between antigen and antibody. Thanks to immunochemical methods we can determine the presence of specific antibodies. One of the important immunochemical methods is ELISA or Enzyme-linked immunosorbent assay. ELISA is a special type of enzyme immunoassay. The basic principle is the interaction of antigen and antibody to form an immunocomplex. In order for this immunocomplex to be measurable, a conjugate must be added to cause a colour reaction. The practical part is focused on the testing of specific IgG antibodies against SARS-CoV-2. Sixteen human serum samples were examined. The serum samples were from people of different age groups. The sera were from vaccinated persons, vaccinated persons with a history of Covid 19 disease, unvaccinated persons with a history of Covid 19 disease, or unvaccinated persons without a history of Covid 19 disease. In addition, six calibrators, a positive and a negative control were measured. A total of 24 microtiter wells were occupied. The Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA kit from EUROIMMUN was used. All measurements were performed using a DYNAREAD photometer and processed using AlaDYN software. The results were different levels of antibodies. Out of 16 serum samples, 2 samples came out negative, one sample came out borderline and 13 samples came out positive.

Klíčová slova

ELISA, AlaDYN, QuantiVac, SARS-CoV-2, IgG

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 3. 5. 2022

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. Tomáš Nix, Ph.D.

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Zdravotně sociální fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Specializace ve zdravotnictví / Zdravotní laborant