Izolace, separace a studium významných kov-vazných proteinů

Ing. Sylvie Skaličková

Doctoral thesis

Isolation, separation and study of metal binding proteins

Abstract:

Kov-vazné proteiny jsou významnou skupinou biomolekul v živých organismech. Zastupují zde mnoho životně důležitých funkcí jako je udržení homeostázy esenciálních kovů v organismu, podílejí se na detoxifikaci těžkými kovy, pomáhají antioxidačnímu systému vyrovnat se s volnými radikály způsobujícími oxidační stres. Řada z nich patří do skupiny životně důležitých enzymů, katalyzující biochemické reakce. Mimo jiné jsou kov-vazné proteiny součástí vrozené imunity pro boj proti patogenním bakteriím a také jsou výbornými transportéry nejen pro esenciální molekuly, ale mohou být využity pro cílený transport ve velmi rozvíjející se oblasti, nanomedicíny. Existuje řada metod, jak lze tyto specifické proteiny studovat a sledovat jejich interakce s dalšími biomolekulami. Mezi základní metody patří kapalinová chromatografie, která umožňuje jejich izolaci z biologických vzorků, dále byly v této práci použity imunochemické metody, spektrofotometrické metody a elektrochemické metody, pomocí kterých lze objasnit chování a vlastnosti těchto molekul v různém prostředí. Cílem předkládané práce bylo optimalizovat metody pro separaci a studium kov-vazných proteinů.

Abstract:

The metal binding proteins are important group of biomolecules effects in living organisms. They represent series of vital important functions such as homeostasis of essential metals, they are involved in heavy metals detoxification, helps antioxidant system with free radical neutralization to prevent oxidation stress. Lot of them belongs to group of important enzymes catalyzing biochemical reactions. Last, but not least they are part of innate immunity system against pathogenes and could be utilized as a carrier cages in target drug therapy due to their unique transporter properties. A number of methods have been developed to study and observe the interactions between metalloproteins and specific biomolecules. First of all, the liquid chromatography enables isolation of required proteins from biological matrices. Further experiments utilized immunochemical, spectrophotometrical and electrochemical methods to clarify their properties and behaviour in various environments. The aim of the thesis was optimized analytical methods for separation and studying of the metal binding proteins.

Keywords

apoferrinin, kov-vazné proteiny, laktoferrin, metalothionein, kapalinová chromatografie, spektrofotometrie, elektrochemie

Keywords

metalloproteins, apoferritin, metallothionein, lactoferrin, liquid chromatography, spectrophotometry, electrochemistry

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 19. 7. 2016

Thesis defence

• Supervisor: doc. RNDr. Pavel Kopel, Ph.D.

Mendel University in Brno

Faculty of Agronomy

Doctoral programme / field:
Chemistry / Agricultural Chemistry