Nové biodetekční systémy pro hodnocení anti/estrogenní aktivity

Bc. Michaela Vyhňáková

Diplomová práce

New biodetection systems for the evaluation of estrogenic activity

Anotace:

Tato diplomová práce se zabývá optimalizací in vitro metody ke stanovení estrogenity různých chemických látek pomocí transkripční aktivace lidského estrogenového α-receptoru. Pracovalo se s buněčnou linií hERα-HeLa-9903, testovalo se dlouhodobé fungování modelu pro standardní modelovou látku 17β-estradiol a výsledky detailní charakterizace byly porovnány se zavedenou metodou testování na linii MVLN. Testovány byly také různé typy rozpouštědel pro vzorky, stejně jako různá koncentrace těchto rozpouštědel a její vliv na stanovování estrogenního efektu. Jako další modelové látky byly analyzovány přirozený estrogen estriol (E3), umělý hormon často používaný v antikoncepčních přípravcích 17α-ethinylestradiol (EE2) a mykoestrogen zearalenon (ZEA). V rámci ověření této metody byly také zpracovány environmentální vzorky z povrchového toku.

Abstract:

The optimization of stably transfected human estrogen receptor-α transcriptional activation assay for detection of estrogenic agonist-activity of chemicals is described in this diploma thesis. This method is using hERα-HeLa-9903 cell line. The long-term variability of this model for standard agonist 17-estradiol was tested and the results of detail characterization were compared with well-established MVLN assay. Different sample dissolving agents as well as different concentration of solvents and their effect on measurement of estrogenity were evaluated. Natural estrogen estriol (E3), synthetic hormone often used in contraceptive pills 17α-ethinylestradiol (EE2) and mycoestrogen zearalenone (ZEA) were analyzed as further model compounds. Within the validation of this method the environmental samples from surface watercourse were tested.

Klíčová slova

endokrinní disrupce, estradiol, estrogenní receptor, hERα-HeLa-9903, in vitro testy, MVLN, endocrine disruption, estrogen receptor, in vitro assays

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 8. 1. 2014

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 10. 2. 2014
• Vedoucí: doc. Mgr. Klára Hilscherová, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Chemie / Chemie životního prostředí