Stanovení viability štěpu krvetvorných buněk metodami průtokové cytometrie

Eliška FIALOVÁ

Bachelor's thesis

Stem cell´s viability assesment using flow cytometry

Anotácia:

Tato práce se zabývá toxickými účinky dimethylsulfoxidu na počet viabilních CD34+ buněk ve štěpu. CD34+ buňky obnovují hematopoezu po transplantaci krvetvorných buněk při léčbě hematologických malignit typu leukemie, lymfomů a nádorů z plazmatických buněk. K měření množství CD34+ buněk ve štěpu je využívána technika průtokové cytometrie. V teoretické části jsou shrnuty základní poznatky o dané problematice. V praktické části je popsána metodika zpracování štěpu, kryoprezervace a měření jeho kvality. Dále jsou zde uvedeny výsledky experimentu, při kterém se měřil počet viabilních CD34+ buněk před a po aplikaci dimethylsulfoxidu jako kryoprotektiva ke štěpu krvetvorných buněk. Podařilo se prokázat, že po aplikaci dimethylsulfoxidu dochází ke statisticky signifikantnímu snížení počtu viabilních CD34+ buněk.

Abstract:

This thesis deals with toxic effects of dimethyl sulfoxide on amount of viable CD34+ cells in the graft. CD34+ cells are important for successful engraftment of the graft after transplantation of hematopoietic stem cells during the therapy of hematologic malignancies (such as leukemia, lymphoma or plasma cell tumors). Flow cytometry analysis are used for measurement of the amount of CD34+ cells in the graft. The theoretical part contains basic information about the given problem. In the practical part there is described the methodology of graft processing, cryopreservation and measurement of its quality. There are also presented the results of the experiment in which was measured the number of viable CD34+ cells before and after application of dimethyl sulfoxide as a cryoprotective agent in the graft. It has been demonstrated that the application of dimethyl sulfoxide statistically significant decreases the viability of CD34+ cells.

Kľúčové slová

průtoková cytometrie, kmenové buňky, hematopoeza, kryoprezervace, dimethylsulfoxid, viabilita buněk, CD34+ kmenové buňky

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 21. 6. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: RNDr. Martin Novák, Ph.D.

PALACKÝ UNIVERSITY OLOMOUC

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biology / Molecular and Cell Biology