Analýza exprese nízkomolekulárního FGF-2 u lidských embryonálních kmenových buněk

Bc. Žaneta Konečná

Master's thesis

Expression of low molecular weight FGF-2 in human embryonic stem cells

Abstract:

Lidské ES buňky mají unikátní schopnost neomezené proliferace v nediferencovaném stavu, která je významně podporována FGF-2. FGF-2 je přidáván do kultivačních médií pro lidské ES buňky, ale tyto buňky si ho také mohou samy produkovat. LMW FGF-2 může být sekretován do extracelulárního prostoru, ale mechanizmus této sekrece zůstává neobjasněný. Předpokládá se, že sekretovaný LMW FGF-2 působí autokrinně nebo parakrinně na lidské ES buňky a podporuje jejich „kmenovost“. Tato práce je zaměřena na mechanizmus sekrece LMW FGF-2 lidskými ES buňkami, pro jehož objasnění bylo využito lidských ES buněk se sníženou expresí Tec kinázy, jejíž úloha v sekreci FGF-2 byla prokázána v jiných buněčných typech. Zjistili jsme, že Tec kináza je skutečně zahrnuta v mechanizmu sekrece LMW FGF-2 u lidských ES buněk, jelikož u buněk se sníženou expresí Tec kinázy byla narušena sekrece LMW FGF-2, ale také proliferace. To naznačuje, že LMW FGF-2 působí autokrinně nebo parakrinně na lidské ES buňky a tím podporuje jejich unikátní vlastnosti. Také jsme zjistili, že Tec kináza je pravděpodobně zahrnuta v signální dráze MAPK, která také podporuje proliferaci u lidských ES buněk.

Abstract:

Human ES cells have unique features including unlimited proliferation in undifferentiated state, which is significantly supported by FGF-2. FGF-2 is added into culture media for human ES cells, but it can be also produced by human ES cells themselves. LMW FGF-2 can be secreted into the extracellular space, but the mechanism of its secretion remains unclear. It is believed that LMW FGF-2 secretion is followed by its autocrine or paracrine signaling, which has an important supportive influence on human ES cells stemness. This thesis is focused on mechanism of LMW FGF-2 secretion in human ES cells and for this, Tec knockdown cells with reduced expression of Tec kinase, which is predicted to be involved in this mechanism, were established. We found that Tec kinase is really involved in mechanism of LMW FGF-2 secretion in human ES cells, because Tec knockdown cells had significantly impaired LMW FGF-2 secretion and also proliferation. This suggests that LMW FGF-2 acts in an autocrine or paracrine way on human ES cells to maintain their stemness. However, we also found that Tec kinase is probably involved in MAPK signaling pathway in human ES cell, which leads to support of human ES cells proliferation also.

Keywords

Lidské ES buňky, FGF-2, Tec kináza, human ES cells, Tec kinase

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 15. 5. 2012

Thesis defence

• Date of defence: 14. 6. 2012
• Supervisor: prof. Ing. Petr Dvořák, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Molecular Biology and Genetics