Vztah mikroorganismů v substrátu k myceliu hlívy ústřičné (Pleurotus ostreatus) a konkurenční houbě Trichoderma pleurotum

Bc. Lenka Zadrobilová

Diplomová práce

Relationship of microorganisms in substrate to mycelium of Pleurotus ostreatus and to competitive mould Trichoderma pleurotum

Anotace:

Souhrn Z celosvětového hlediska nabývá pěstování léčivých a jedlých hub stále většího významu. Začaly se používat nejen jako potravina, ale stále více i jako součást veterinární a humánní medicíny. Mezi nejvíce pěstované druhy se řadí hlíva ústřičná (Pleurotus ostreatus), žampion dvouvýtrusý (Agaricus bisporus), houževnatec jedlý - Shii-ta-ke (Lentinula edodes), šupinovka nameko (Pholiota nameko) či hlíva máčková (Pleurotus eryngii). S rozvojem pěstování jedlých a léčivých hub se museli pěstitelé začít zabývat i ochranou před chorobami a škůdci, kteří napadají pěstované druhy hub a způsobují velké ekonomické ztráty. Mezi chorobu, která působí velké ztráty na zisku při pěstování hlívy ústřičné (Pleurotus ostreatus) se řadí i plíseň, kterou způsobuje druh Trichoderma pleurotum. Tato tzv. zelená plíseň je pozorována v pěstírnách celého světa. Díky svému agresivnímu růstu, způsobovaným ekonomickým ztrátám na výnosech a její obtížnou ochranou, začala být v posledních letech šířeji studována. Předložená práce se zabývala vztahem mikroorganismů v substrátu k myceliu hlívy ústřičné (Pleurotus ostreatus) a ke konkurenční houbě Trichoderma pleurotum. Pokusy byly rozděleny do osmi částí, ve kterých byly testováním v in vitro podmínkách hodnoceny vztahy mezi Pleurotus ostreatus a Trichoderma pleurotum na pěstebních substrátech kolonizovaných bakteriemi (Bacillus subtilis a Bacillus macerans) a fermentovaných v různých podmínkách. Vyhodnocení bylo provedeno statisticky metodou ANOVA. V případě společného růstu Trichoderma pleurotum a Pleurotus ostreatus v in vitro podmínkách projevuje Trichoderma pleurotum rychlejší růst kolonií a není rozdíl při zaočkování současně a se zpožděním. Jednotlivé kmeny Trichoderma pleurotum i Pleurotus ostreatus se projevují rozdílným vzhledem i rychlostí růstu kolonií. Při přípravě substrátu je třeba dbát na prevenci. Při zjištění výskytu Trichoderma pleurotum je pravděpodobné, že dojde k velmi rychlému růstu její kolonie. Při společném růstu Bacillus a Pleurotus ostreatus v in vitro podmínkách oba organismy neprojevily antagonistický ani synergický vztah. Bacillus a Pleurotus ostreatus se dělí o prostor a o živiny. Při společném růstu Trichoderma pleurotum a Bacillus rozhoduje o životaschopnosti kolonií každého organismu rychlost obsazení prostoru. Pokud je podpořen růst Bacillus před tím, než se projeví Trichoderma, je pravděpodobné, že Trichoderma bude na svém růstu negativně ovlivněna. Testováním nebyl prokázán vliv plynných metabolitů při společném růstu Pleurotus ostreatus a Trichoderma pleurotum na růst ani jednoho z organismů. Testováním vybraných 9 kmenů Bacillus a Trichoderma pleurotum, všech 9 kmenů Bacillus projevilo negativní účinek na růst Trichoderma pleurotum. U kmenů Bacillus se jednalo o dosud neidentifikované druhy Bacillus, které byly odebrány z tuzemských pěstíren hub. Při zjišťování vlivu Bacillus subtilis, Bacillus macerans a filtrátů ze slámových substrátů ošetřených a neošetřených teplotou na růst Pleurotus ostreatus (3 kmenů) v in vitro podmínkách, Bacillus subtilis a filtrát č. 3 (filtrát z tepelně ošetřeného substrátu) podpořily růst všech testovaných kmenů Pleurotus ostreatus Bacillus macerans má neutrálním vliv na růst Pleurotus ostreatus. Při zjišťování vlivu Bacillus subtilis, Bacillus macerans a filtrátů ze slámových substrátů ošetřených a neošetřených teplotou na růst Trichoderma pleurotum v in vitro podmínkách, projevil Bacillus subtilis a Bacillus macerans spíše neutrální vztah. Použití obou filtrátů výrazně negativně ovlivnilo růst Trichoderma pleurotum u obou kmenů. Testováním všech druhů organismů bylo zjištěno, že lze zvolit postup

Anotace:

přípravy substrátu tak, aby byla negativně ovlivněna na růstu Trichoderma pleurotum. Jedná se především o tepelné ošetření substrátu pro pěstování hlívy, kdy se omezí růst Trichoderma pleurotum a následné využití metabolitů vzniklých v substrátu po tepelném ošetření, které podporují růst Pleurotus ostreatus. Hypotéza, že lze zvolit takový postup fermentace pěstebního substrátu hlívy, který zajistí jeho selektivitu pro hlívu a odolnost vůči konkurenční houbě Trichoderma pleurotum se potvrdila. Cíl práce, zjistit zda je možné zvolit vhodný postup fermentace pěstebního substrátu pro pěstování Pleurotus ostreatus a zvýšit tak odolnost vůči konkurenční houbě Trichoderma pleurotum, která způsobuje velké ekonomické ztráty pěstitelům hub po celém světě, byl naplněn.

Abstract:

The cultivation of medicinal and edible mushrooms has been taking on a growing importance from a global perspective. They began to be used not only as food, but increasingly as a part of veterinary and human medicine. Among the most cultivated species belong Pleurotus ostreatus, Agaricus bisporus, Lentinula edodes, Pholiota nameko or Pleurotus eryngii. With the development of the cultivation of edible and medicinal mushrooms, growers had to start dealing with the question of some protection against diseases and pests that attack cultivated species of fungi, and thus cause big economic losses. One of the diseases which causes big profit losses to the production of Pleurotus ostreatus is considered to be a special kind of a mould, caused by the kind of Trichoderma pleurotum. This so-called green mould disease has been observed in growrooms around the world. Due to its aggressive growth, economic losses in yield and its difficult protection, the green mould disease has been recently widely studied. The aim of this study was to investigate whether it is possible to select a suitable fermentation of growing medium for the cultivation of Pleurotus ostreatus and increase the resistance to the fungus Trichoderma pleurotum which causes big economic losses to mushroom growers around the world. The work examines the relationship of microorganisms in the substrate for Pleurotus ostreatus and the competing fungus Trichoderma pleurotum. The attempts were divided into eight parts, in which by their testing under in vitro conditions, the relationships were evaluated between Pleurotus ostreatus and Trichoderma pleurotum growing substrates colonized by bacteria (Bacillus subtilis and Bacillus macerans) and fermented in different conditions. The evaluation was done statistically using the method ANOVA. In case of shared growth Trichoderma pleurotum and Pleurotus ostreatus in vitro conditions, Trichoderma pleurotum manifests rapid growth of colonies and there is no difference at seedling simultaneously or consecutively. Individual strains of Trichoderma pleurotum and Pleurotus ostreatus show not only different appearance, but also different growth rate of the colonies. By the detection of occurrence of Trichoderma pleurotum, it is likely that the colonies will grow very rapidly. Bacillus and Pleurotus ostreatus in shared growth under in vitro conditions did not show either synergistic or antagonistic relationship. Bacillus and Pleurotus ostreatus share the space and nutrients. In case of shared growth of Trichoderma pleurotum and Bacillus, the occupancy rate of space decides about the viability of colonies of each organism. If the growth of Bacillus is supported before Trichoderma appears, it is likely that the growth of Trichoderma will be negatively affected. By testing of the shared growth of Pleurotus ostreatus and Trichoderma pleurotum there was no influence on the gaseous metabolites. By testing nine selected strains of Bacillus and Trichoderma pleurotum; all nine strains of Bacillus have shown the negative effect on the growth of Trichoderma pleurotum. There were found yet unidentified species of Bacillus, which were taken from domestic plantations of fungi. Further verification could be more appropriate for the strain selection of Bacillus and for the Trichoderma pleurotum growth suppression When determining the effect of Bacillus subtilis, Bacillus macerans and the straw of straw treated and untreated substrates for the growth temperature of Pleurotus ostreatus (3 strains) under in vitro conditions, Bacillus subtilis, and the filtrate no. 3 (the filtrate from the heat-treated substrate) supported the growth of all tested strains of Pleurotus ostreatus Bacillus macerans has a neutral effect on the growth of Pleurotus ostreatus. When determining the effect of Bacillus subtilis, Bacillus macerans and the straw filtrates of treated and untreated substrates for the growth temperature of Trichoderma pleurotum in vitro conditions, Bacillus subt

Abstract:

ilis and Bacillus macerans showed rather a neutral relation. Using both filtrates, however, had a significantly negative impact on the growth of Trichoderma pleurotum in both strains. When verifying the effect of the straw filtrate of treated and untreated substrates for the growth temperature of selected strains of Trichoderma pleurotum and Pleurotus ostreatus, the result was that it negatively affects using substrates that have undergone a storage in the freezer, which probably caused variable and different observations from previous attempts. By testing all kinds of organisms, it was found that it is possible to choose a method for preparing a substrate so as to adversely affect the growth of Trichoderma pleurotum. This is essentially a thermal treatment of the substrate for Pleurotus ostreatus cultivation which limits the growth of Trichoderma pleurotum and subsequent utilization of metabolites formed in the substrate after heat treatment to promote the growth of Pleurotus ostreatus. The hypothesis that this way of Pleurotus ostreatus cultivation of substrate fermentation can be chosen to ensure the selectivity for Pleurotus ostreatus and its resistance to the fungus Trichoderma pleurotum was confirmed. The aim of the study was to determine whether it is possible to select a suitable fermentation of growing medium for the cultivation of Pleurotus ostreatus and increase the resistance to the fungus Trichoderma pleurotum which causes big economic losses to fungi growers around the world. Keywords: Antagonism; Mushroom cultivation; Pleurotus; Selective substrate; Trichoderma

Klíčová slova

Pleurotus ostreatus, Bacillus subtilis, B. macerans, Trichoderma pleurotum, substráty

Keywords

Antagonism, Mushroom cultivation, Pleurotus, Selective substrate, Trichoderma

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 10. 4. 2015

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. Ivan Jablonský, CSc.

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Magisterský studijní program / obor:
Rozvoj venkova a zemědělství / Rozvoj venkovského prostoru